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千金藤素对胰腺癌细胞凋亡作用的研究*

2021-12-29梁瑞华陈红霞

湖北科技学院学报(医学版) 2021年5期
关键词:剂量检测

梁瑞华,吴 娜,陈红霞,任 平

(湖北科技学院药学院,湖北 咸宁 437100)

胰腺癌是最致命的恶性肿瘤之一,患者确诊时往往已处于晚期,因此,大多数治疗方案效果不佳,预后差,其5年生存率低至2%[1-2]。目前已有许多文献[3-5]报道胰腺癌患者对一线化疗药物吉西他滨耐药,因此,寻求新的用于治疗胰腺癌的药物非常必要。千金藤素(cepharanthine,CEP)是一种从防己科千金藤属植物千金藤中提取的活性成分,属于异喹啉类生物碱,具有抗疟疾、抑菌、调节免疫、抗肿瘤等药理功能[6]。有研究[7-8]表明CEP能够抑制结直肠癌、黑色素瘤、肺癌等肿瘤细胞的增殖,但是,关于CEP对胰腺癌作用的研究报道很少。我们主要探讨CEP对胰腺癌AsPC-1细胞的作用,为CEP治疗胰腺癌提供重要的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

人胰腺癌AsPC-1细胞株由华中科技大学实验室赠送;CEP购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司,纯度>98%;DMSO购自Sigma;胎牛血清购自BI;RPMI-1640培养基购自美国Hyclone公司;双抗购自Gibco;MTT购于上海碧云天生物科技公司;PARP、caspase-3、cleaved-caspase-3、cleaved-casepase-9和β-actin抗体购自万类生物科技公司;ECL发光剂购自大连美仑生物技术公司;凋亡试剂盒、台盼蓝染液购自上海碧云天生物科技公司。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养

胰腺癌细胞AsPC-1培养于含10%小牛血清、1×105U/L青霉素和100mg/L链霉素的RPMI-1640培养液中,置于37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱中培养。每隔2d传1次代。

1.2.2 MTT法检测细胞活力

取对数生长期的AsPC-1细胞调整细胞悬液浓度,以每孔8 000个细胞接种于96孔板中,当细胞生长融合至70%~80%时,各组中加入100μL不同浓度(0、2.187 5、4.375、8.75、17.5、35μmol/L)的CEP处理48h,对照组中加入100μL的培养基,每个浓度……

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