小鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养、鉴定及其TRPC1-7 mRNA的表达
2021-12-29刘阳生
刘阳生
(咸宁市第一人民医院神经内科,湖北 咸宁 437000)
中枢神经系统中,星形胶质细胞约占大脑总体积50%[1],它为神经元提供能量与营养支持,调节突触活性,还可以调节神经元内外离子、水以及神经递质的平衡,影响神经元的电活动。星形胶质细胞的这些特点决定其在缺血性脑损伤、神经细胞再生和神经退行性疾病中均发挥着重要作用[2]。高纯度星形胶质细胞的获得是体外研究其功能和机制的基础。星形胶质细胞原代培养过程中,易混杂多种细胞成分如成纤维细胞、小胶质细胞和少突胶质细胞,因此,建立一种稳定有效的星形胶质细胞培养纯化方法是体外研究的前提,为体外研究其功能和机制打下基础。
瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)是重要的Ca2+通道,广泛分布于从酵母到人类的各种生物体,通过改变细胞内游离钙的浓度而发挥重要作用,有研究表明其与神经系统疾病相关[3]。哺乳动物TRP超家族可分为TRPA、TRPC、TRPM、TRPML、TRPP、TRPV和TRPN 7个家族,在体内分布广泛,TRPC离子通道是位于细胞膜上的一类非选择性阳离子通道,迄今,已在哺乳动物中发现7种TRPC蛋白:TRPC1、C2、C3、C4、C5、C6和C7,其中TRPC2为一种假基因编码故在人体内缺失[4]。钙库操纵性钙内流(SOCE),即细胞内质网钙库耗竭,从而引发胞外Ca2+流入细胞内质网的这一过程,SOCE钙通道的开放或关闭,调节细胞外Ca2+内流。一般认为,SOCE通道有赖于TRPC和Orai(calcium-release-activated-calcium channel protein)的参与[5]。众所周之,星形胶质细胞为非兴奋性细胞,且SOCE在非兴奋性细胞的钙信号中很重要[6],TRPC通道在培养星形胶质细胞中都有表达[7],因此,TRPC通道在星形胶质细胞中作为常见信号传递方式之一,胞内Ca2+水平变化与细胞生长、运动、周期、分泌、兴奋、代谢、转录、细胞分化及凋亡等相关。……
