郑良良，张弛

(金华市中心医院，浙江 金华 321000)

神经损伤包括中枢神经损伤和外周神经损伤，坐骨神经损伤是常见的外周神经损伤，多由慢性疾病导致[1-2]。神经损伤的修复始终是临床上的热点和难点问题。目前，临床常采用电疗法、营养神经药物疗法及干细胞移植疗法等[3-4]。干细胞具有多向分化潜能，如人脐带血间充质干细胞(human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells，hUCB-MSCs)可以分化为脂肪细胞和神经细胞等[5-6]。但干细胞易老化且分化方向不易控制，限制了干细胞在神经损伤修复中的广泛应用[7-8]。外泌体(exosome，Exo)是一类由细胞分泌的具有双层磷脂结构的囊泡，其携带大量遗传物质，能够通过膜融合和胞吞的方式，将遗传信息传递至受体细胞中，影响受体细胞的增殖、分化[9-12]。神经生长因子(nerve growth factor，NGF)是由神经元分泌的重要生长因子，能够促进神经元增殖和分化。研究表明，NGF能够促进骨髓间充质干细胞向神经元分化，具有保护神经胶质细胞的作用[13]。为了探究NGF过表达的hUCB-MSCs来源Exo(NGF-hUCB-MSCs-Exo)修复大鼠坐骨神经慢性压迫损伤(chronic constriction injury，CCI)的效果及作用机制，我们围绕NGF-hUCB-MSCs-Exo开展了相关的实验研究，现总结报告如下。

1 材料和仪器

1.1 实验材料hUCB-MSCs(中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所)。雄性Sprague Dawley大鼠(浙江中医药大学实验动物中心)，均为无特定病原体动物，年龄(3.46±0.12)周，体质量(255±32)g，实验动物许可证：SYXK(浙)2019-0024。实验方案经金华市中心医院医学动物实验伦理委员会审查通过。

1.2 实验试剂胎牛血清和DMEM培养基(美国Gibco公司)，非特异性兔抗鼠CD34、CD45、CD90和CD105一抗(英国……