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3种猪自然细胞毒性受体多克隆抗体制备与鉴定

2021-12-23史腾飞童德文

中国兽医学报 2021年11期
关键词:检测

杜 谦,杨 楠,史腾飞,朱 磊,黄 勇,童德文

(西北农林科技大学 动物医学学院,陕西 杨凌 712100)

自然杀伤(natural killer,NK)细胞是机体先天免疫的重要组成部分,与机体的抗病毒感染和免疫调节密切相关[1]。在机体抵抗病毒感染过程中,NK细胞主要通过自然杀伤作用直接靶向杀伤被感染的细胞,进而控制病毒的感染。在机体产生了针对病毒抗原的特异性抗体后,NK细胞可以通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(antibody dependent cell mediated cytotoxicity,ADCC)来杀伤被感染的靶细胞,从而进一步达到清除病毒的目的[2]。另外,NK细胞还具有间接的免疫调节功能,它可以与机体其他多种免疫细胞相互作用,调控这些免疫细胞的数量和功能,从而调节机体的免疫功能,增强机体免疫系统对病毒反应能力[3]。NK细胞的这些功能受其细胞膜上相应受体产生的抑制和激活信号控制[4]。自然细胞毒性受体(natural cytotoxicity receptors,NCRs)是一类NK细胞的重要受体[5],主要由3种Ⅰ型跨膜蛋白NCR1(NKp46)、NCR2(NKp44)和NCR3(NKp30)组成,分别由基因NCR1、NCR2和NCR3编码[6]。NK细胞上这些受体的选择性参与可以刺激NK细胞产生细胞毒性,当NCRs与靶细胞上的相应配体(NCR ligands,NCRLs)结合,NK细胞被激活后,通过定向分泌穿孔蛋白和颗粒酶至靶细胞,同时通过分泌包括γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在内的细胞因子,启动靶细胞的凋亡程序,进而杀伤靶细胞[7]。NCRs以跨膜蛋白的形式贯穿NK细胞的细胞膜,其结构域可分为跨膜域、胞内域和胞外域3部分,其中胞外域一般指膜蛋白位于细胞外的区段,具有识别配体分子并激活信号通路的作用,因而多以NCRs胞外域作为抗原制备抗体,进而研究这些受体在病毒防御中的作用[8]。……

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