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胸膜肺炎放线杆菌 Apx Ⅳ 与多杀性巴氏杆菌 OmpH 基因的表位筛选及真核表达载体的构建

2021-12-23姚景丽武静桥范真玮张东超何敬文金天明

中国兽医学报 2021年11期

姚景丽,武静桥,范真玮,张东超,赵 微,陈 婷,何敬文,金天明

(天津农学院 动物科学与动物医学学院 天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室,天津 300384)

由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)引起的猪传染性胸膜肺炎(porcine contagious pleuropneumonia,PCP)和多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocide,Pm) 引起的猪萎缩性鼻炎(porcine infectious atrophic rhinitic,AR)以及猪肺疫(swine pneumonic pasteurellosis)是猪场常见的呼吸道传染病,常呈混合感染,因此,二联疫苗的研发具有现实必要性。

溶血外毒素(Apx)是 APP 引起宿主肺部感染最主要的毒力因子。目前,已经发现的 Apx 有 ApxⅠ/ApxⅡ/ Apx Ⅲ/ Apx Ⅳ 4种,研究发现,Apx Ⅳ 存在于 APP 所有血清型中,可使血清抗体效价较其他外毒素明显增加,功毒试验可提供完全保护[1]。猪巴氏杆菌 OmpH 作为菌体外膜蛋白的一种,可有效诱导动物产生特异抗体,从而发挥免疫保护作用。抗原表位又称抗原决定簇,是抗原分子中决定其特异性的化学基团。抗原表位与相应的淋巴细胞表面抗原受体相结合,进而激活淋巴细胞,引起免疫应答反应[2]。在免疫应答过程中,被 T 细胞受体(TCR)识别的表位称作T细胞表位,被 B 细胞受体(BCR)识别的表位称作 B 细胞表位[3]。表位疫苗是基于已知结构蛋白的核苷酸或氨基酸序列,利用计算机软件进行辅助分析,筛选抗原蛋白上 T、B 细胞所识别的优势抗原表位,经人工合成或借助基因工程技术制备含有优势抗原表位的多肽疫苗。抗原表位间插入柔性肽进行连接,所构建的新肽段,可以避免抗原表位间形成新的表位[4],有利于抗原结合。多表位疫苗技术现已成为当前疫苗研究领域的一种新型策略[5]。……

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