曾 军，周夏飞，张 维

成都医学院第一附属医院 呼吸与危重症医学科(成都 610500)

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension，PAH)的主要病理学改变是由于肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells，PASMCs)过度增殖和迁移导致的肺血管重构，表现为细小动脉肌化、闭塞，中膜增厚，丛状损害以及坏死性动脉炎[1]，目前其发病机制尚不清楚，治疗手段有限。肌细胞增强因子2(myocyte enhancer factor 2，MEF2)是一种特定的转录因子，具有DNA 结合能力，与相关基因结合调控肌肉细胞、干细胞、神经细胞、淋巴细胞的增殖和分化，受表观遗传学机制调控。MEF2 基因家族由MEF2A、MEF2B、MEF2C和MEF2D4个成员组成。其中，MEF2C 在肌肉细胞的发育、分化、表型改变及增殖等方面发挥作用，可能参与PAH的发生、发展，但目前未阐明其具体机制[2-3]。有研究[4-7]表明，组蛋白去乙酰化酶4(histone deacetylase 4，HDAC4)可通过上调MEF2C，调节骨骼肌分化、增殖表型改变、心血管和神经系统发育,并与血管内膜畸形增殖有关。因此，推测HDAC4可调控MEF2C介导的肺动脉平滑肌细胞增殖。本研究通过干预小鼠肺动脉平滑肌细胞的HDAC4蛋白功能，检测HDAC4、MEF2C表达水平变化，并观察小鼠肺动脉病理改变，以期为PAH分子机制提供新的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物及分组 健康雄性BALB/C小鼠32只，8周龄，体重20～25 g，由北京维通利华实验动物技术公司提供。随机分为：阴性对照组(NC组)、PAH组、HDAC4抑制剂(HDAC4 inhibitor,HDAC4i)组、PAH+HDAC4i组，每组8只。

1.1.2 主要设备 Powerlab生理记录仪、Millar微压力导管(SPR-835)，均来自美国AD instruments公司。

1.1.3 主要试剂 MEF2C兔单克隆抗体(5030S, 美国CST)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)兔单克隆抗体(19245S, 美国CST)、骨桥蛋白(OPN)兔多克隆抗体(ab8448,英国Abcam)、HDAC4兔单克隆抗体(ab12172, 英国Abcam)、GAPDH兔单克隆抗体(ab181602,英国Abcam)、TB Green®Fast qPCR Mix试剂盒……