周向平，许清孝，刘 峰，周 立，张洪波，樊 建，袁志辉

（1. 湖南省烟草公司永州市公司，湖南 永州 425100；2. 湖南科技学院，湖南 永州 425199；3. 湖南省银杏工程技术研究中心，湖南 永州 425199）

烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus，TMV）是烟草花叶病毒属的代表种，也是研究最为广泛的病毒之一。TMV的寄主非常多，可浸染包括30个科的310多种植物[1]。TMV的基因组为单股正链RNA，全长6 395碱基对，共编码4个开放阅读框（ORF），其中外壳蛋白（coat-protein，CP）编码基因在TMV病毒分类中是一个主要的相关基因[2]。TMV在不同植物寄主上有许多不同的株系，我国主要有TMV-U1、TMV-U2、兰花株系、番茄株系、葫芦科株系、车前草株系和豆类株系；烟草上的株系主要有TMVN、TMV-OM、TMVRS、TMV-U1、TMVC、TMV-Vulgare、TMVY[3]。TMV是烟草的主要病原物之一，感染后烟叶产量下降、品质变劣，常造成巨大的经济损失[4-6]，且目前还缺乏有效的防控措施[7]。近年来，随着烟草漂浮育苗技术的普遍应用，由TMV引起的花叶病在烟草上发生严重[8]，对烟叶品质及产量均造成较大影响。同时，永州不同县区气候的差异性及其独特的地理地质特点也导致了烟草花叶病毒的变异频繁，出现了多种症状类型。为了查明永州主要烟区TMV株系的归属，笔者以采自永州不同烟区的病样为材料，通过对TMVCP基因的克隆及序列分析，并与国内外报道的主要株系（或分离物）的同一基因进行比较，研究其病毒株系的归属，以期为TMV的防控及快速检测方法的研究提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 供试样品供试样品分别于2020年4月27—29日采集自永州市江永县、新田县、宁远县、江华县、蓝山县、道县等不同烟草种植区，采样植株表现出花叶、叶片皱缩、植株矮化等症状。……