张勇 夏悦明 赖晓兰 闵松林 雷文俤

(宁德市医院 1.普外二科；2.血液科；3.急诊科，福建 宁德 352100)

结直肠癌(colorectal cancer, CRC)是世界上第三大常见的胃肠道癌症类型，其发病率和死亡率均较高。近年来，每年约有180万新病例被诊断为CRC，占所有癌症发病率的约10%，且每年有80万的病例死于CRC[1-2]。各种环境因素和不良生活方式均会导致CRC的发生，例如吸烟、酒精摄入等。传统上CRC的疗法包括腹腔镜切除手术、放疗和化疗，但治疗后仍然会出现副作用，甚至癌症复发，因此迫切需要探究CRC新的治疗策略。结直肠癌肿瘤干细胞(colorectal cancer stem cells，CRC-CSCs)与其他肿瘤干细胞一样，具有自我更新和无限增殖的能力，可介导CRC肿瘤的生长、转移与复发。目前研究表明，CRC治疗后复发的主要原因可能是CRC-CSCs无法根除[3]，因此，靶向抑制CRC-CSCs的恶性生物学行为可能是CRC治疗的重要策略。活化转录因子3(Activating transcription factor 3, ATF3)是具有碱性亮氨酸拉链结构的转录因子，属于ATF/CREB家族的成员，可在多种条件下调节基因的表达[4]。研究表明，ATF3在动脉粥样硬化、心肌肥大以及多种癌症发病机制中均发挥重要作用，且已发现ATF3与CRC恶性演进相关[5-7]。因此，本研究以分选CD133+表达的CRC-CSCs为对象，探究靶向敲减ATF3对CRC-CSCs自我更新、上皮间质转化等恶性生物学行为的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 人结直肠癌细胞系HCT116购自中国上海科学院细胞库，胰蛋白酶、胎牛血清、牛血清白蛋白、双抗、McCoy’s 5a培养基以及DMEM/F12培养基购自Hyclone公司，TRIzol试剂、PrimeScriptTM1st Strand cDNA Synthesis Kit、SYBR®Premix Ex TaqTMII试剂盒购自日本Takara公司，CCK-8试剂盒和ELISA试剂盒购自凯基生物公司，免疫荧光染色试剂盒购自博士德生……