高 川 付海洋 刘 敏 周奎臣

(1.佳木斯大学，黑龙江 佳木斯 154007；2.佳木斯大学附属第一医院检验科，黑龙江 佳木斯 154007)

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)包括了非酒精性脂肪肝(NAIL)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，NASH疾病发展严重时可导致肝硬化、肝细胞癌(HCC)，必要时须进行肝脏移植。近些年来，NAFLD的发病率越来越高，NASH患病率也进一步增加,并且NAFLD尚无公认的特效治疗方法[1，2]。奥贝胆酸(Obeticholic acid，OCA)，是法尼酯 X受体(Farnesoid X receptor, FXR)的天然配体，能够调节肝脏脂质，促进细胞再生，保护肝脏，但其存在瘙痒等不良炎症反应[3]。白藜芦醇(Resveratrol,RSV)具有很好的抗炎症、抗氧化效果[4]。SOD和MDA是评价氧化应激的两个指标，检测方法有ELISA、蛋白凝胶电泳、分光光度法等。本文用分光光度法检测OCA联合RSV在NAFLD细胞模型上的应用，以评价抗氧化应激和降脂效果。

1 材料与方法

1.1 实验材料

药品：奥贝胆酸(厦门海乐景生化有限公司);白藜芦醇(上海迈瑞尔化学技术有限公司)；试剂：游离脂肪酸(棕榈酸∶油酸=1∶2，棕榈酸：天津市科密欧化学试剂有限公司，油酸：西陇科学股份有限公司);MDA、SOD试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

仪器：紫外可见分光光度计(岛津仪器(苏州)有限公司)。

1.2 实验对象

以HepG2细胞为实验对象，调节细胞密度为1×105/mL，加入24孔培养皿中培养24 h。

1.3 药物干预

细胞贴壁后，加入正常培养基的为对照组(CON),其余组在均加入含有500 μmol/L游离脂肪酸的培养基后，分为模型组(MOD)、联合用药组(OCA+RSV)、奥贝胆酸组(OCA)，每组3个复孔，继续培养24 h；各给药组加入各药物的浓度为5 μmol/mL，继续培养24 h。

1.4 结果检测

培养完成后，取各组的培养液300 μL分别装在1.5 mL的EP管中，4 ℃保存备用。……