李森森，杨再波△，朱 彬，童国勇，张宏谧

（1.湖北恩施土家族苗族自治州中心医院口腔诊疗中心，恩施 445000；2.湖北民族大学附属民大医院口腔科，恩施 445000）

口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）是常见的恶性肿瘤，占所有头颈鳞状细胞癌（HNSCC）病例的40%，通常表现为侵略性行为，经常导致局部浸润和早期淋巴结转移[1]。大多数OSCC 患者在诊断时处于晚期临床阶段，由于手术难以根治并且预后较差，OSCC 的5 年生存率＜50%[2]。约25%～50%的患者在治疗后会出现局部复发和远处转移[3]。因此，寻找可靠的生物标志物和新的分子靶点对于开发和实施OSCC患者的精准个性化治疗至关重要。

同源结构域相互作用蛋白激酶2（homeodomain-interacting protein kinase 2，HIPK2）属于丝/苏氨酸蛋白激酶家族成员，通过参与调控基因表达对细胞周期、凋亡及衰老具有调控作用[4]。相关研究表明，HIPK2可作为抑癌基因，抑制乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌等肿瘤的发生和发展，或表达上调发挥促癌作用[5-7]。HIPK2 在OSCC 中表达升高，且以仅胞质阳性表达为主，与OSCC 的密预后密切相关[8]。但HIPK2 对OSCC 的具体作用机制尚未见相关报道，因此，本文通过构建HIPK2 短发夹RNA 沉默HIPK2 表达，探究其对OSCC 细胞SCC-25 生长、自噬及裸鼠移植瘤生长的影响。

1 材料和方法

1.1 实验试剂

DMEM 培养基、胎牛血清、青—链霉素和胰蛋白酶购自美国Gibco公司；人舌磷癌细胞SCC-25购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库；BCA蛋白浓度测定试剂盒、辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG 购 自Thermo Fisher；一 抗HIPK2、c-Myc、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Bcelin1、ATG7、LC3Ⅰ/LC3Ⅱ和Actin购自英国Abcam公司。

1.2 细胞培养

SCC-25 细胞置于37 ℃、5%CO2恒温培养箱中用高糖DMEM培养基（含10%胎牛血清和1%青—链霉素）培养，每3 d更换1次培养基，收集细胞时用0.25%胰蛋白酶消化，试验选用对数生长期细胞。……