刘 硕，常 谨，刘英琦

（1.河北邯郸市第一医院颌面外科，邯郸 056002；2.河北工程大学附属医院整形外科，邯郸 056000）

黑色素瘤是由黑色素细胞发生恶性转化而形成的。恶性黑色素瘤具有极强的侵袭力，易出现转移，治愈率及预后极差[1]。因此，寻找有效的治疗黑色素瘤方法是目前的热点及难点。PI3K/Akt 信号通路是经典的调控细胞增殖和凋亡的通路[2]，可以通过调控多种细胞因子的表达而抑制细胞凋亡，诱导肿瘤细胞增殖分化。PI3K/Akt 信号通路与肿瘤细胞的血管形成、化疗药物耐药、放疗抵抗密切相关[3]。黑色素瘤的发病机制、治疗与PI3K/Akt 信号通路息息相关[4-5]，有研究显示，Notch1 调控PI3K/Akt信号通路促进黑色素瘤细胞生长[6]。S100A6属于S100蛋白家族成员，它能与游离的钙离子结合而发挥生物学作用，可以参与细胞的增殖、凋亡等多个生物学过程。已有研究表明，增加S100A6 表达可通过上调PI3K/Akt信号通路中Akt的磷酸化促进人骨肉瘤细胞143B 增殖和迁移，添加PI3K 抑制剂（LY294002 或wortmannin）在一定程度上逆转了S100A6 对143B 细胞中Akt 磷酸化的上调作用，同时，也逆转了S100A6 表达对143B 细胞的影响[7]。但是，S100A6对黑色素瘤细胞增殖、侵袭、迁移的明确作用还尚未见相关报道。因此，探讨S100A6 对黑色素瘤细胞A375增殖、侵袭和迁移的影响，并初步分析其可能的机制。

1 材料与方法

1.1 材料

人黑色素瘤细胞（A375 系）（货号：CL-0014）购买于武汉普诺赛生命科技有限公司。胎牛血清、胰蛋白酶溶液（含酚红，含0.25%EDTA）、RPMI 1640培养基（ATCC Modification）、DMEM 高糖培养基、opti-MEM 等，购自美国Gibco 公司；转染试剂Lipofectamine3000 购自美国Thermo 公司；兔抗c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、PI3K、p-PI3K、GSK3β、AKT、p-AKT 多克隆抗体购自美国Abcam 公司；……