狼疮肾炎DN2细胞的CRAC和病情活动相关性分析

2021-12-16叶宝奎杨念生

中山大学学报(医学科学版) 2021年6期

关键词：研究

李雪，曾琴，王双，叶宝奎，杨念生

（中山大学附属第一医院风湿科，广东广州 510080）

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythemato⁃sus，SLE）是一种典型的自身免疫性疾病，以产生抗核抗体和抗dsDNA抗体等自身抗体为特征［1-2］。狼疮肾炎（lupus nephritis，LN）是SLE最常见并发症之一，也是严重影响预后的临床表现之一［3］。LN发病机制不清，目前认为，自身反应性B细胞激活后产生的自身抗体，与抗原结合形成免疫复合物沉积于肾脏，激活补体系统，引起肾脏损害，可见B细胞与SLE及LN的发生和发展有密切关系［4-5］。LN患者存在B细胞异常，包括初始B细胞降低、记忆性B细胞增加、抗体分泌细胞及CD138+浆细胞增加［6-9］。近几年研究发现SLE患者外周血中DN2细胞即双阴性B细胞比例增高，这类细胞为CD19+CD27-IgD-CD11c+CD21-，高表达转录因子Tbet，为自身免疫抗体分泌细胞前体细胞［10］。Ca2+是细胞内重要的第二信使［11］。钙库操纵性钙内流（store-operated Ca2+entry，SOCE）是淋巴细胞主要的钙内流途径，为免疫反应所必须［12］。钙离子释放激活的钙离子通道（Ca2+release-activated Ca2+，CRAC）介导SOCE钙内流。CRAC组成蛋白包括位于细胞膜上的钙离子通道Orai蛋白和内质网上的基质互作蛋白（stromal interaction molecule，STIM）［13-14］。然而DN2细胞的CRAC蛋白表达情况目前仍不清楚，需要进一步探索。因此，本研究拟探讨狼疮肾炎（LN）患者外周血DN2细胞的比例，以及DN2细胞钙离子释放激活的钙离子通道（CRAC）蛋白的表达情况及其与临床指标的相关性。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和仪器

流式抗体：CD19-PE/CY7、CD27-AF700、anti-IgD-BV421、CD11c-Percy5.5和CD21 APC/Fire 750（Biolegend，美国）；Orai1（Abcam R&D，英国），羊抗兔IgG AF488（Thermo Fisher，美国）。Fluo 3-AM（Sigma，美国）、流式细胞仪（CytoFLEX S Beckman Coulter，美国）。