小鼠肝细粒棘球蚴和多房棘球蚴病不同时期病灶周围组织纤维化对比

2021-12-15邢稚坤王二强高风亦赵雪源谭小武俞晓凡吴向未

中国人兽共患病学报 2021年11期

关键词：小鼠

邢稚坤，王二强，廖原，高风亦，赵雪源，谭小武，俞晓凡，吴向未

棘球蚴病是一种世界范围的人兽共患病，以细粒棘球蚴绦虫(Echinococcusgranulosus，Eg)、多房棘球蚴绦虫(Echinococcusmultilocularis，Em)幼虫引起的疾病最为常见[1]。棘球蚴病可发生在肝、肺、脑等部位发生，肝脏是其最常见的好发部位[2-4]。棘球蚴寄生于肝脏后会引起周围组织炎症反应、肉芽组织增生、纤维化、钙化等一系列病理生理变化，其中纤维化会伴随整个寄生过程[5]。由Eg引起的肝囊型包虫病(Cysticechinococcosis，CE)和由Em引起的肝泡型包虫病(Alveolarechinococcosis，AE)周围组织纤维化情况有所不同，造成两种棘球蚴的治疗方式不同。前期研究发现包虫周围组织纤维化主要由I型胶原(CollagenⅠ，COL1)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ，COL3)、Ⅳ型胶原(CollagenⅣ，COL4)构成，其中COL1、COL3的含量较高[6-7]。本实验通过HE、masson、免疫组化染色，对比小鼠不同时间段两种包虫纤维化进程的区别，进一步了解多房棘球蚴体内生长发育过程，从而寻找更好的诊疗方案。

1 材料与方法

1.1 实验动物及器材

1.1.1 主要耗材本实验所用一抗(COL1：ab34710；COL3：ab184993；α-SMA：ab124964；TGF-β1：ab92486)、Masson染色试剂盒来自abcam公司，HE染色试剂盒来自生工生物工程(上海)股份有限公司，免疫组化二步法试剂盒(PV-6001)来自北京中杉金桥生物技术有限公司，1640培养基来自gibco，青链霉素混合液来自北京索莱宝科技有限公司，胎牛血清来自杭州四季青生物工程材料有限公司。

1.1.2 主要仪器 Leica轮转式切片机(RM2245)，蔡司显微镜(Axio Imager 2)，赛默飞Excelsior AS自动组织脱水机，赛默飞公司二氧化碳培养箱(Heracell 240i)，Eppendorf公司移液器。

1.1.3 实验动物来自北京维通利华实验动物技术有限公司，1月龄雌鼠90只。