赵兵，孔鹏飞，吴至久，唐学贵

（川北医学院附属医院肛肠科，四川 南充 637000）

0 引言

慢传输性便秘(STC)是肛肠科的一种常见疾病，属于功能性便秘，育龄妇女及老年人好发[1]。长期便秘会引起或加重多种疾病的发生，如：心脑血管意外、结直肠疾病、肛门疾病等，严重危害人们的身心健康，为此，寻求安全有效的治疗方法尤为重要。麻仁丸作为临床上常用的通便药物，在治疗便秘的过程中取得较好的疗效。我们为探索便秘的发病机制及麻仁丸的通便机理，特设计动物实验，研究麻仁丸对便秘大鼠结肠NOS1 表达的影响，进而探讨便秘的发病及麻仁丸的通便作用机制。

1 材料和方法

1.1 材料

选取SD 大鼠36 只作为实验动物，雌雄各半。试验药物包括复方地芬诺酯和麻仁丸，试剂包括大鼠NOS1 一抗免疫组化试剂和兔SP 检测试剂盒，

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组

36 只SD 大鼠，随机分为3 组：空白组、便秘模型组、麻仁丸治疗组。

1.2.2 动物造模及标本采集

根据课题组前期造模方法建立大鼠慢传输型便秘模型，空白组大鼠正常喂食，不造模型，不做治疗，模型组只造模型，不做药物治疗，麻仁丸组大鼠造模后按3.0 g/kg 用药量配制成4mL 混悬液灌胃，3 天1 个疗程，疗程间间隔1 天，共2 个疗程[2]。模型建立完成，集体处死大鼠，取结肠6～8mm，放入多聚甲醛固定。

1.2.3 免疫组化检测

组织块固定包埋切片，按照试剂盒说明书步骤进行免疫组织化学检测，用高分辨率图像分析仪Image-Proplus6.0 测定各视野的平均光密度（density mean, MD）值[3]。

1.3 统计分析

2 结果

2.1 各组大鼠结肠NOS1 免疫组化结果

阳性表达主要位于肌间神经丛的神经元细胞，呈棕红色。空白组阳性表达分布均匀；与空白组相比，模型组阳性表达较空白组升高。与模型组相比，麻仁丸组阳性表达降低，麻仁丸组与空白组相比，阳性表达增高。见图1-3。

图1 空白组结肠 NOS1×400

2.2 各组大鼠近端结肠NOS1 表达平均光密度值（MD）

空白组分别和便秘组、麻仁丸组相比，其MD 值低于其他两组（P<0.05），差异有统计学意义；麻仁丸组和便秘模型组相比，其MD 值低于便秘模型组（P<0.05），差异有统计学意义。见表1。

表1 各组大鼠结肠免疫组化NOS1 表达平均光密度值（MD）比较（±s）

表1 各组大鼠结肠免疫组化NOS1 表达平均光密度值（MD）比较（±s）

注：*与空白组比较，P<0.05；# 与便秘模型组比较，P<0.05。

分组 例数 NOS1空白对照组 12 0.095±0.013便秘模型组 12 0.346±0.021*麻仁丸治疗组 12 0.205±0.015#

图2 便秘组结肠 NOS1×400

图3 麻仁丸组结肠NOS1×400

3 讨论

STC 是一种功能性便秘，主要治疗药物包括泻剂和促进肠道蠕动药。STC 属于中医便秘的范畴，病因包括饮食不节、情志不舒、劳倦过度等，其病位在大肠，与肺,脾,肝,肾相关[4]。STC 是慢性便秘最常见的一种类型，当药物治疗效果不佳时，外科手术也是STC 治疗的重要方法[5]。相比于西医治疗，中药治疗便秘具有独特的优势，临床疗效良好。麻仁丸作为一种常用润下剂，有润肠通便之效，适用于治疗便秘。方中麻仁为君药，起润肠通便之功效；大黄、杏仁、芍药共同起到通便、降气、养阴之功，为臣药；枳实、厚朴起行气破结的功效；蜂蜜则润燥滑肠。杨格等研究得出，麻仁丸能使老年下肢骨折患者发生便秘的几率降低，值得临床推广[6]。付峰研究认为中药麻仁丸能显著减轻便秘型肠易激综合征患儿的腹部症状和便秘程度[7]。

NO 是生物体中重要的信使分子，参与细胞间的信号传导。人们常常通过对一氧化氮合酶（NOS）的研究来反映NO的变化情况。STC 的发病机制复杂，NO 是否参与便秘的发病是近年来的研究热点。赵仕彭等[8]通过建立便秘模型，经免疫组化检测发现便秘大鼠结肠NOS 含量升高。谭丽等[9]通过实验研究发现NOS 在STC 大鼠结肠表达增高，可能在大鼠便秘发病中起重要作用。C Cortesini 等[10]研究认为一氧化氮合酶阳性神经元细胞表达升高，能抑制肠道收缩，导致便秘的发病。R Tomita 等[11]研究认为STC 患者结肠一氧化氮表达增高，提示一氧化氮可能参与便秘的发病。卢建珍等研究认为宣肺通便方治疗功能性便秘疗效显著，其机制可能是借助肺-肠轴，通过下调NO 水平达到治疗便秘的作用[12]。阙任烨等[13]研究得出便秘患者与健康人相比，血清NO、TNOS、iNOS 含量显著增高，经治疗后明显降低。

通过本研究发现：NOS1 阳性表达主要位于肌间神经丛的神经元细胞，便秘组表达明显增高，而经麻仁丸治疗后，便秘组大鼠结肠NOS1 表达明显降低。这与前述相关研究结果相一致。由此，我们推断，NOS1 在结肠的表达增高，可能影响肠神经传导而导致便秘的发病，而麻仁丸的通便作用，可能与降低NOS1 在大鼠结肠的表达有关，通过修复肠神经传导功能达到治疗便秘的作用。