陈平亚，张亮亮，吴少荣，黄纪徽，王绥家，吴山楠

（海口海关技术中心，海南 海口 570311）

【研究意义】对虾急性肝胰腺坏死病（Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease,AHPND）是一种细菌性病害，通常在放苗35 d 左右暴发，病死率高，曾造成我国海南、广东、福建和广西对虾养殖场大面积发病。该病一般在高温干旱季节的高盐、高碱养殖池中具有较高的发病几 率［1］。斑节对虾（Penaeus monodon）、凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）和中国对虾（Fenneropenaeus chinensis）都是 AHPND 的易感种群［2］。患病对虾出现空肠空胃或肠断节，肝胰腺萎缩或肿大、呈红褐色或发白，甲壳变软等症状，死亡率极高。AHPND 的组织学病理特征是肝胰腺上皮细胞脱落，由于血细胞活动形成黑色素沉积，在该病晚期肝胰腺内的黑点更加明显，并有大量血细胞聚集［3-4］。AHPND 病原菌是一种携带PVA1 毒素质粒的嗜盐海洋性副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus,VpAHPND）。嗜盐海洋性副溶血性弧菌与已知的副溶血性弧菌分离株的基因不同，这种新菌株携带一个或多个染色体外PVA1 质粒。并非所有副溶血弧菌都表现出AHPND 致病性［5］，PVA1 质粒携带编码毒素蛋白的基因却能够导致AHPND。因此依据PVA1 质粒设计特异性引物和探针对嗜盐海洋性副溶血性弧菌的检测十分必要。

【前人研究进展】对VpAHPND全基因组测序发现，其携带了约 69 kb 大小的毒力质粒，包含一组共轭转移基因和两个质粒启动基因，是一种自传递的质粒［6-7］。毒力质粒具备质粒解离后致死系统，可防止质粒在后代细胞中发生丢失，这种毒性质粒可通过接合传播，并可在受体中永久遗传［8］。基因敲除或自然缺乏Pir毒素基因，可使菌株明显丧失致病能力，因此推断Pir 毒素可能是AHPND 的主要致病因子。……