刘昊，韩昌胜，迟显苏，杨振霄，王祥宇，王新，马柯

(山东中医药大学中医学院，山东 济南 250355)

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物

1.1.2 实验药物

地西泮、PCPA、吐温80、生理盐水(山东中医药大学实验室)，酸枣仁汤(山东中医药大学国医堂医院)。

1.1.3 实验仪器

BAS224S电子天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司)，5 mL、10 mL注射器(江西洪达医疗器械集团有限公司)，灌胃针头(北京创博环球生物科技有限公司)，旷场实验系统(上海欣软XR-XZ301)，高架十字迷宫系统(上海欣软XR-XG201)，SMART 3.0动物行为学视频采集与分析系统、SuperMaze动物行为学视频分析系统、大鼠雌二醇(E2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒(上海宸功生物公司)，离心机(力辰科技 LC-LX-HL210D)。

1.2 实验方法

1.2.1 药物制备

酸枣仁汤根据仲景原方换算，为计算方便，按照古代的1两相当于16 g来换算 ，酸枣仁汤配方剂量为：酸枣仁110 g[10]、茯苓32 g、川芎32 g、知母32 g和甘草16 g，煎取600 mL，放入4 ℃冰箱保存备用。

因PCPA较难溶于水，故先用吐温80助溶，再加入生理盐水配制成溶液，现用现配。地西泮粉末经生理盐水溶解后配置成溶液，现用现配。

1.2.2 动物分组

实验动物按照随机数字法分为4组，分别为酸枣仁汤组、地西泮组、模型组和空白组。每 10 只大鼠(雌雄各半)为一组，雌雄两性分别置于两个 RVC 笼子内，大鼠的饲料和饮水采用任食任饮方式。

1.2.3 造模方法

实验采用腹腔注射PCPA的方法构建大鼠失眠模型，将需要配制使用的PCPA混合摇匀，模型组、地西泮组、酸枣仁汤组于每日7：30—8：30按 350 mg /kg以 10 mL /kg 腹腔注射给药，1次/d，持续3 d。对照组在相同时间腹腔注射等量生理盐水。

注射完成后，大鼠造模成功的标志为其出现昼夜节律消失，白昼不停活动，出现不安、躁动等表现[11]。……