傅松波，马承旭，井高静，赵 楠，汤旭磊*，牟军勤，常寅龙

(1.兰州大学第一医院 内分泌科，甘肃 兰州 730000；2.兰州市城关区人民医院 内分泌科，甘肃 兰州 730030)

乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer，PTC)10～15年的存活率达到85%，预后良好。然而，部分乳头状甲状腺癌患者会发展到侵入邻近组织(如淋巴结)，预后较差[1]。因此，阐明部分乳头状甲状腺癌侵袭转移的分子机制和开发具有诊断及判断乳头状甲状腺癌预后的分子标志物具有重要意义。miRNA表达谱揭示差异表达的miR-182-5p和乳头状甲状腺癌的临床复发密切相关[2]，miR-182的表达水平比正常甲状腺组织增加3倍[3]，其在乳头状甲状腺癌癌变中起致癌作用。

苦参碱(matrine)具有诱导肿瘤细胞周期停止[4]、增加肿瘤细胞的凋亡、降低肿瘤细胞的增殖[5]和迁移[6]等作用，具有抗多种肿瘤细胞活性。本研究表明苦参碱显著的降低TPC-1中miR-182-5p的表达，但是，苦参碱治疗乳头状甲状腺癌的分子机制是否与miR-182-5p相关尚未报道，本文将探讨苦参碱降低miR-182-5p的表达对乳头状甲状腺癌TPC-1细胞系增殖和迁移的影响，为临床应用苦参碱治疗乳头状甲状腺癌提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要材料、试剂及细胞

苦参碱(大连美仑生物技术有限公司)；RPMI-1640培养基、DMEM培养液、胰蛋白酶和血清(Gibco公司)；CCK-8试剂盒(北京同仁生物科技有限公司)；Transwell小室(康宁生物科技有限公司)；EndoFectin-Max 转染试剂、miR-182-5p mimics及miR-182-5p抑制剂(GeneCopoeia公司)，E-cadherin、N-cadherin和vinmentin抗体(Abcam公司)。人甲状腺正常细胞系Nthy-ori 3-1和人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1(北京北纳创联生物技术研究院)。

1.2 方法

1.2.1 细胞的分组及处理：分为两大组，1)药物处理组(分别用0、0.25、0.5和1 mg/mL的苦参碱处理TPC-1细胞)；……