郑 新，于海波

(佳木斯大学附属第一医院 心血管内三科，黑龙江 佳木斯 154002)

缺血性心脏病是一种全球性、对人类健康危害极大的心脏疾病。治疗过程中血流急速再灌注导致心肌负荷过大在很大程度上损伤了心肌细胞，致使细胞凋亡数量大大增加造成组织损伤进行性加重，此过程被称为心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury，MI/RI)[1]。研究显示，在该病患者的血液中检测发现心肌酶水平明显升高[2]。Toll样受体(TLR)4作为能够介导多种细胞因子活化的细胞受体有报道显示其在心肌组织灌注受损时呈现过表达，可能介导了MI/RI的炎性反应[3]。微小RNA(miRNA)是近些年发现的一种新的基因表达调节物，miR-146a定位于人类5号染色体，具有免疫调节作用[4]。然而目前关于miR-146a在MI/RI的作用效果及作用原理的相关研究未见报道。因此本实验通过对大鼠模拟MI/RI，探讨miR-146a对该病大鼠的血清心肌酶谱、TLR4及心肌细胞凋亡作用的影响机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物:SPF级SD大鼠36只，雄性，体质量220～250 g，7～8周龄，实验室平均温度(22±2)℃，相对湿度60%，常规喂养(上海赛伦生物公司，动物实验伦理委员会批准，批准号20160071)。

1.1.2 试剂:乌拉坦(武汉卡布达公司)、一抗TLR4兔抗鼠抗体、TNF-α兔抗鼠抗体、NF-κB兔抗鼠抗体及二抗(武汉艾美捷公司)、TUNEL试剂盒(Roche公司)、PVDF膜(Millipore公司)；RT-qPCR试剂盒(广州东盛生物科技有限公司)；cTnT检测试剂盒、CK-MB检测试剂盒(上海佰晔生物公司)和LDH检测试剂盒(合肥莱尔生物公司)。

1.2 方法

1.2.1 大鼠的分组及处理：将大鼠分为假手术组(sham)、模型组(model)、miR-146a NC组(结扎后转染miR-146a-NC)、miR-146a agomir组(结扎后转染miR-146a-a agomir)，均9只。各组大鼠分为……