胡婷婷，侯品品，魏子妤，叶 枫，莫小辉，Christos C. Zouboulis，鞠 强

寻常痤疮是常见的毛囊皮脂腺单位慢性炎症性疾病，炎症贯穿其发生始终，是寻常痤疮发病的启动环节[1]。皮脂腺脂质分泌增多是寻常痤疮发生的前提条件[2]。近来发现，皮脂腺细胞能够分泌白细胞介素(IL)-6等脂肪因子（adipokine），成为脂质代谢和炎症反应研究有趣的细胞模型[3]。IL-6是寻常痤疮病程中重要的炎性因子，但在皮脂腺细胞中的作用不明。IL-6通过与其特异性受体结合，实现其生物学功能[4]；其受体存在IL-6膜受体（IL-6R）及可溶性受体（sIL-6R）两种模式。IL-6R介导的信号通路是经典信号通路，而sIL-6R介导的为反式信号通路（trans-signaling）；在表达IL-6R的靶细胞上，IL-6首先与IL-6R结合[5]。笔者以体外培养的永生化SZ95人皮脂腺细胞作为细胞模型，检测IL-6R的表达及IL-6对皮脂腺细胞脂质合成的影响，力图阐明IL-6在寻常痤疮发生发展中的作用，为疾病的诊疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试剂及仪器

永生化SZ95人皮脂腺细胞由德国Zouboulis CC教授馈赠，Sebomed培养基（Biochrom公司），CCK8试剂盒（武汉博士德公司），酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（R＆D公司），重组人IL-6（Pepro Tech公司；PBS 溶解至 100 μg/ml），兔抗人IL-6R一抗（Abcam公司）、鼠抗人SREBP1一抗（Santa Cruz公司）、余一抗均购于Cell Signaling Technology公司。引物序列由上海生工生物技术有限公司代合成。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 SZ95人皮脂腺细胞培养于Sebomed培养基，添加10%胎牛血清、5 μg/L表皮生长因子、100 U/ml青霉素、100 μg/ml链霉素和 1 mmol/L CaCl2。37℃含5% CO2的孵箱孵育，隔日换液。工作时新鲜配制含或不含各种浓度的IL-6的工作培养基。

1.2.2 ELISA法 24孔板接种细胞（每孔1×105个、6.5×104个、3×104个），复3孔，次日换液，分别继续培养24 h、48 h及96 h后收集上清。……