陈慧 吴娟 邹宇聪

南方医科大学第三附属医院康复科（广州 510630）

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）是一种发病机制尚未明确的主要累及中轴骨骼的慢性炎症性疾病，特征是病理性成骨，最终可进展到脊柱或关节僵硬和永久性残疾［1］。因此AS 治疗的关键在于抑制病理性成骨。DKK-1 是Wnt/βcatenin 通路的天然抑制剂，其表达下调可促进大量骨质形成，是AS 病理性成骨的关键因子［2］。研究［3］表明AS 的骨赘形成与DKK-1 降低相关。然而DKK-1 表达下调机制尚未明确。

表观遗传学是在未改变DNA 序列情况下，研究基因可遗传性表达的一门学科［4］，包括DNA 甲基化、非编码RNA、组蛋白翻译后修饰、染色质重塑［5］。DNA 甲基化是最常见的表观遗传修饰形式，通常基因高甲基化可导致基因“沉默”［6］。基因启动子区域富含CpG 岛，是发生DNA 甲基化的主要区域［7］。近期研究表明DKK-1 甲基化可促进子宫颈癌［8］、直肠癌［9］、白血病［10］等疾病的进展，而尚无DKK-1 甲基化与AS 的关联性研究。为了揭示在AS 中骨赘形成时DKK-1 下调的机制，选择髋关节强直的AS 患者为研究对象，检测骨化的髋关节囊的DKK-1 表达和甲基化状态，为AS 病理性成骨机制和治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象选取我院因髋关节强直需接受髋关节置换手术、成形术或病损切除术的AS 患者，均符合1984年修订的纽约诊断标准［11］，此外选择因外伤致股骨颈骨折（FNF）需行髋关节置换手术的患者。

1.2 主要试剂及仪器组织DNA 抽提试剂盒（美基生物科技有限公司，广州）；DNA 甲基化转化及纯化试剂盒（康为世纪生物科技有限公司，北京）；PCR Master Mix（宝生物工程有限公司，大连）；……