浅谈影响ELISA试验结果的因素
2021-12-03秦万强
当代畜禽养殖业 2021年3期
秦万强
(贵州省务川仡佬族苗族自治县动物疫病预防监测中心,贵州 务川 564300)
1 ELISA实验室诊断方法概述
酶联免疫吸附法 (enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)是一种特殊的试剂分析方法,在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫检测技术。ELISA是以免疫学反应为基础,根据抗原抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的非放射性标记免疫检测技术,其试剂易于保存、结果判断较为客观,具有敏感性高和特异性强等优点。
2 试验结果的影响因素
2.1 试剂盒的选择
试剂盒的质量直接影响结果的准确性。目前市面上生产试剂盒的厂家较多,不同厂家的试剂敏感性、特异性不尽相同,导致检测结果就会有一定的差别,目前我们使用的试剂盒购自武汉科前有限公司、深圳康百得有限公司和深圳真瑞有限贵公司,不同试剂盒各有优缺点,但主要成分是相同的。
试剂盒使用前应恢复至室温(20~25℃),摇匀、结晶溶解后方可使用,显色液不要暴露于强光和接触氧化剂,不同品种、不同批号的试剂盒组分不得混用,这是为了保证数据的准确性。不同试剂使用时应防止交叉污染,所有废弃物在丢弃之前应进行高压灭菌。
2.2 前期样品处理
首先是待检样品的预处理对检测结果有一定的影响,样品须血液凝固析出血清后进行血清分离,一部分血清未析出需用离心机进行血清分离,尽量取上清液,如果混浊会对检测结果造成一定的干扰;其次是溶……
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