肖 扬 陈 康 丛倩倩 安秀荣 边银丙*

（1.华中农业大学应用真菌研究所，武汉 430070；2.泰安市农业科学院，山东 泰安 271000）

平菇黄斑病主要是由托拉斯假单胞杆菌（Pseudomonas tolaasii）引起的细菌性病害。平菇种质资源非常丰富，利用品种抗病性防控黄斑病是最经济有效的方法之一。前人对平菇品种黄斑病抗性的室内外测定方法进行了探索[1-3]；关注到菌盖色泽与抗病性存在一定的关系[4,5]；并通过人工接种病原菌试验将11 个品种的抗病性划分为高感、中感、中抗和高抗4 个类型，发现品种抗病性与子实体颜色及出菇温度存在一定的相关性[6]。以下报道平菇不同品种自然发病情况的调查结果，以及品种抗病性和病斑扩展速度与菌柄硬度、菌盖色泽的关系研究结果。

1 材料与方法

1.1 供试品种及其栽培

选择97 个平菇品种（表1），在山东省泰安市农业科学院食用菌栽培基地进行春季大棚栽培试验。大棚长约30 m，宽约10 m，高约3.5 m。采用常规玉米芯为主料的栽培配方：玉米芯60%、棉籽壳27%、麦麸10%、过磷酸钙1%、石灰1%、石膏1%。拌料堆制发酵后，装袋灭菌。每个供试品种栽培30 袋，设3 个重复，每重复10 袋。

表1 供试平菇品种分别按菌柄硬度和菌盖色泽的分类

1.2 发病情况调查方法与分级标准

病害调查在2018年4月春季进行。田间调查由3 人小组共同进行，对每个商品菇进行菌柄硬度和菌盖色泽判定。依据菌柄硬度将供试品种分为菌柄偏硬和菌柄偏软两类。依据菌盖色泽将供试品种分为色泽偏深和色泽偏浅两类，前者包括黑褐色和灰黑色，后者包括灰色、灰白色和灰褐色。

统计商品菇中直径大于2 cm 的菌盖发病情况，将发病程度分为6 级：1 级为无病斑；2 级为有零星小病斑或出现少许黄化，病斑不凹陷；3 级为病斑或黄化面积不超过表面积20%，少量病斑凹陷；4 级为病斑或黄化面积达到20%～50%，少量病斑凹陷；5 级为病斑或黄化面积超过50%，但菌盖不腐烂；6 级为病斑或黄化面积达到80%，或菌盖变软腐烂。

统计分析供试品种菌盖发病率和病情指数。病情指数计算方法为：病情指数=Σ（各病级的子实体个数×病级值)／（调查总个数×最高级值）×100。

1.3 品种抗性室内鉴定与观察

平菇黄斑病病原菌托拉斯假单胞杆菌菌株为本实验室保藏菌株，经过菌落形态、16S rDNA 序列分析和Biolog 系统鉴定。制备菌悬液作为接种体，选择色泽偏深或偏浅的26 个代表性栽培品种，采用活体伤口接种方法，待菌盖长至直径约2 cm时，用砂纸轻轻摩擦表面2 次造成微伤口，然后接种，测定品种抗病性。每处理3 次重复，每重复接种5 个菌盖。菇房空气相对湿度保持90%以上，连续观察发病症状。

1.4 试验结果统计分析

用Excel 2010 软件进行数据统计，IBM SPSS Statistics 24 软件进行组间的t测验。

2 结果与分析

2.1 基于菌柄硬度与菌盖色泽的供试品种归类

对97 个平菇供试品种依据菌柄硬度和菌盖色泽进行归类，结果见表1。74 个品种归于菌柄偏硬类，23 个品种归于菌柄偏软类。60 个品种归于色泽偏深类，37 个品种归于色泽偏浅类。

2.2 供试品种菌柄硬度与病情指数的相关性分析

调查表明，菌柄偏硬的74 个品种平均发病率为18.1%，平均病情指数8.05，其中19 个品种没有发病，其他55 个品种发病率介于2.0%～100%之间，病情指数在0.2～50。菌柄偏软的23个品种，平均发病率为37.0%，平均病情指数为21.11，仅2个品种没有发病，其他21 个品种发病率在9.1%～66.7%。t测验结果，菌柄偏硬的品种抗病能力极显著高于菌柄偏软的品种（P＜0.01）（图1）。

图1 平菇菌柄不同硬度品种间的抗病能力差异

2.3 供试品种菌盖色泽与病情指数的相关性分析

对色泽偏深的60 个品种进行发病情况调查，结果有8 个品种没有发病，其余52 个品种发病率为2.8%～85.7%，病情指数为0.6～45.7；60 个品种平均发病率为25.9%，平均病情指数为13.07。

色泽偏浅的37 品种中，11 个品种未发病，其余26 个品种发病率为2.0%～100%，病情指数为0.6～36.9；37 个品种平均发病率为17.1%，平均病情指数为8.03。t测验结果显示，色泽偏浅与色泽偏深品种的抗病能力差异不显著（P＞0.05）（图2）。

图2 平菇菌盖不同色泽品种间的抗病能力差异

2.4 不同品种人工接种后的症状表现

将菌盖色泽差异明显的26 个平菇栽培品种的菌盖进行伤口涂抹，接种黄斑病病原菌，结果显示，菌盖色泽较深的品种感病较快，病斑扩展快，症状更明显，与色泽较浅的品种存在显著差异。

在气温15～25 ℃和空气相对湿度80%以上时，灰黑色品种‘华平801’菌盖接种后发病率达100%，接种后约10 h 开始出现症状，最初为黄白色，渐变为黄色和黄褐色，病斑渐凹陷，菌肉被感染，后期菌盖卷曲，抗病能力弱。而灰白色品种‘华平36’在同样条件下接种，72 h 后才出现少许黄色斑点，色淡，病斑扩展缓慢，且不侵入菌肉内部，菌盖不卷曲，表现出较强的抗病能力（图3）。

图3 不同菌盖色泽平菇品种接种托拉斯假单胞杆菌后的症状

3 结论与讨论

选育抗病品种是防治平菇黄斑病的重要途径，而品种抗病性鉴定是选育抗病品种的前提。前期研究探索了品种抗病性鉴定方法，而田间观察自然栽培环境条件下不同品种的发病率，无疑是鉴定品种抗病性的最直观、最有效的办法。

平菇黄斑病的病原菌主要是托拉斯假单胞杆菌，但其他细菌在特定条件下也会感染平菇子实体，且其发生可能与菌盖表面微伤口存在密切相关。因而，自然环境中病原菌种类和数量，栽培过程的温度、空气湿度、水分和通风管理条件也能直接影响发病程度。

在本品比试验中，菇棚管理水平较高，整体发病程度中等偏低。不同品种出菇期参差不齐，导致调查时每个品种商品菇数量不一致，也影响了发病率和病情指数的调查结果。尽管如此，田间调查依然可以明显判断出不同品种间的抗病性存在差异。

国内外研究者早期已经观察到平菇品种的黄斑病抗性与菌盖色泽存在某种联系，且高温品种抗病性较低温品种强，但多缺乏系统的统计分析[4,6,7]。本研究对不同品种的菌柄硬度和菌盖色泽进行归类，统计分析两个子实体重要性状与病情指数之间的相关性，首次发现菌柄硬度与抗性密切相关，而菌盖色泽影响病斑扩展速度。这些研究结果无疑对开展平菇抗病品种选育具有重要参考价值。

尽管平菇子实体两个农艺性状判断具有一定的主观性，但统计分析能弥补部分不足。当然，对菌柄硬度和菌盖色泽进行更加科学精准的分类判定十分必要，需作进一步深入研究。