酶联免疫吸附法与RT-PCR法对血液标本内乙肝病毒的检验价值比较
2021-12-02张刚
张 刚
(商城县人民医院 检验科,河南 信阳 465350)
乙型肝炎属于常见传染病,其主要由乙肝病毒(HBV) 感染所致,临床表现为上腹部不适、肝区疼痛、乏力等,长期携带HBV 还可诱发肝硬化、肝衰竭等严重并发症,甚至进展为肝癌,威胁患者生命[1]。目前,临床对于该病多以早确诊早治疗为主,因而寻找高效准确的检测方法尤为重要。但随着临床抗病毒药物滥用等情况,使得HBV 出现变异,影响传统血清学检测准确性、敏感性[2]。而随着生物技术发展,实时荧光定量PCR法(RT-PCR) 逐渐用于临床检测,克服传统PCR定量缺陷,对于病毒DNA 定量更为精准[3]。鉴于此,本研究旨在分析酶联免疫吸附法与RT-PCR法应用于HBV 检测中的临床价值,现报告如下。
资料与方法一、一般资料 选取2017年12月-2019年12月我院收治的乙型肝炎患者78 例,其中男41 例,女37 例;年龄27~59 岁,平均年龄(37.55±4.83) 岁。纳入标准:均确诊为乙型肝炎;尚未进行抗病毒治疗;患者及家属知情同意。排除标准:甲型等其他类型肝炎;伴随肝部恶性肿瘤;存在心脑血管严重病变。
二、检测方法 所有患者均于清晨抽取静脉血5mL,置于4℃冰箱2h,离心取得血清后待检。通过酶联免疫吸附法定性检测乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e 抗原(HbeAg)、乙肝表面抗体(HbsAb)、乙肝核心抗体(HbcAb) 及乙肝E 抗体(HbeAb),严格按操作标准执行。RT-PCR 法定量检测:仪器选用达安DA7600,将450μL 的DNA提取液与200μL 血清样本混合,以100℃预热10min,冰冻离心机内离心5min,于PCR 管内置入20μL 上清液,严格按操作程序检测,之后设立阴性、弱阳性、阳性等对照组,反应结束后取Ct 值制作荧光曲线,依据Ct 值计算DNA 值。……
