林 源，郑金宇,，马小虎，杨 林，梁 彤，王 锐,杨延辉

抗体偶联药物(ADC)是通过连接子技术将具有靶向性的抗体与具有生物活性的药物相结合的一种偶联物，使药物获得了靶向性，从而可以靶向到特定的组织或细胞后再释放出药物发挥作用[1]。ADC药物多以针对肿瘤细胞为靶点的抗肿瘤药物[2-4]。2000年，FDA批准了首个ADC药物Mylotarg，用于治疗急性髓性白血病患者。截至2018年，FDA批准了4种抗癌抗体偶联药物，分别针对急性粒细胞白血病、霍奇金淋巴瘤、HER2阳性乳腺癌、急性髓性白血病4种疾病，而全球有超过85个ADC新药处于临床试验的不同阶段[5-7]。ADC药物成功与否取决于靶点、抗体、细胞毒素、连接物4个方面。其中，将具有靶向性的抗体与细胞毒素连接起来的技术，是构建ADC的关键环节。细胞毒素通过连接子可以连接到抗体IgG表面的赖氨酸残基，或连接到铰链区二硫键还原后形成的半胱氨酸。此外，还可通过在抗体特定位点引入半胱氨酸或非天然氨基酸实现毒素的定点偶联[8-10]。偶联后的ADC需要检验其偶联效率和药物抗体偶联比，最后验证其在体内的药代动力学及生物活性。目前，检测ADC偶联效率和药物抗体偶联比(DAR)的方法主要有紫外分光光度法、疏水作用色谱、反相高效液相色谱、液相色谱偶联电喷雾离子化质谱、成像毛细管等电聚焦法等[11-15]。本实验我们尝试将IgG与小分子毒性药物DM1进行偶联，构建了IgG-SMCC-DM1，并通过全波长酶标仪微量测定板进行紫外光谱验证，旨在建立一种可在常规生物学实验室评估ADC偶联率的微量检测方法。……