常 凯，刘晨霞，许宏宣，王艳艳，江忠勇

随着检验水平、数字化治疗设备和多系统联合治疗等技术的发展，人们对疾病的认知程度越加深入，为了给每位患者提供最合适和理想化的治疗措施，精准医疗的概念应运而生[1]。精准医疗高度依赖于对患者的遗传学和其他分子生物学或影像数据分析，使临床预防、诊断和治疗更具特异性，能提高预后水平，降低药物毒副作用等不良后果发生。在精准医疗的大环境下，基因测序技术经历了多次换代，成为精准医疗时代的中坚力量[2]。

基因组携带了生物个体的全部遗传信息，在临床检验学中，基因测序技术弥补了细胞形态学、生物化学、微生物与免疫学的短板，能够直接对人体或病原微生物进行检测、定量及突变位点分析[3]。

1 基因测序技术的发展

基因测序技术发明于1977 年，经过40 余年的发展和进化，该技术已经具有了里程碑式的飞跃。

1.1 第一代测序技术 1977年，TSIATIS A C[4]提出了双脱氧链末端终止法测序，其原理为将ddNTP（缺乏3’-羟基）插入到新和成的DNA 链中，使之不能与下一位脱氧核苷酸形成磷酸二酯键，迫使DNA合成反应停滞。通过电泳分离不同长度的片段，并检测所测片段的末端碱基，拼接好即为完整DNA序列。在此后近30 年间，随着标记技术与工业水平的提高，同位素标记、荧光标记和毛细管电泳技术逐渐进行加持，测序通量和自动化均得到了大幅提升[5]。由于一代测序具有操作门槛低、读取长度长、准确率高（接近100%）等优点，目前临床中多用于单基因病和突变位点的基因检测，其演变出的毛细管电泳法一直作为基因诊断的标准。……