王鸿利 何 琴 刘 帆 袁 霞 张 勤

（四川省医学科学院·四川省人民医院老年内五科，成都610072）

动脉粥样硬化是一种慢性炎症疾病，以内皮细胞（endothelial cells，EC）为初始靶点，导致内皮功能障碍从而引发炎症［1-3］。有研究表明双特异性磷酸酶 6（dual-specificity phosphatase 6，DUSP6）参与炎症相关生理过程并促进炎症反应，而抑制DUSP6 过表达是有效的消炎疗法［4-6］。microRNA（miRNA）是一种内源性非编码RNA，具有约22 个核苷酸，通过与mRNA 的3'非翻译区（3'UTR）结合来抑制基因的翻译或诱导mRNA 切割，从而调节基因表达［7］。miRNA 已被证明参与多种炎症反应的调节并且部分RNA 可参与调节与动脉粥样硬化的发生和发展有关的血管壁炎症［8-10］。研究发现miR-145-5p 可通过多种途径缓解体内炎症反应，但其对动脉粥样硬化发生过程的调节还未见报道［11-12］。脂多糖（lipo‐polysaccharide，LPS）是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分，可激活血管内皮细胞，引起白细胞渗透进入血管壁，并增加血管通透性，被认为是炎症反应的有效诱导剂［13］。在本研究中，以LPS 诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）为炎症损伤模型，探讨了miR-145-5p对血管EC 氧化损伤和炎症的调节作用及相关的分子机制，旨在为动脉粥样硬化引起的EC 损伤治疗提供新的依据。

1 材料与方法

1.1 材料 HUVECs 来自美国ATCC。LPS、高葡萄糖DMEM 培养基、胎牛血清均购自Sigma公司；链霉素和青霉素购自HyClone 公司；pcDNA、miR‐NC、pcDNA-DUSP6、miR-145-5p mimic、pMIR 报告质粒载体及试验所用序列购自RiboBio 公司；Lipo‐fectamine2000 试剂购自Invitrogen 公司；试验所用抗体均购自上海艾博抗生物科技有限公司；BCA 试剂盒，iNOS 检测试剂盒和IL-10 检测试剂盒购自合肥莱尔生物科技有限公司；反转录试剂盒购自TaKaRa公司；……