杨建波，刘鹏，张文兴，陈青山，邓芳芳

湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007

肝癌是常见的一种全球性实体恶性肿瘤[1]，具有极高的发病率以及病死率，对人类的生命健康具有严重的影响[2]，一般会有肝区疼痛、腹水、乏力等症状[3]。通常情况下，肝癌有手术、冷冻、化疗等治疗方式[5]，但由于化疗对其作用不明显，有效率较低，同时有不良反应[6]，因此，寻求新的抗癌中药至关重要。华蟾素注射液是一种具有抗肿瘤作用的中药注射液[7]，是从中华大蟾蜍皮中提取加工出来的，具有清热解毒、活血化瘀等功效[8]，可抑制肿瘤细胞生长，提高机体免疫功能，在肺癌、皮肤癌、胃癌等疾病中已有应用[9]。本研究主要探讨其对肝癌细胞的效用。

1 材料

1.1 细胞人肝癌HepG2细胞株(江阴雨汐生物科技有限公司，货号：YX-005)。

1.2 药物与试剂华蟾素注射液(安徽华润金蟾药业股份有限公司，批号：Z34020273)。胎牛血清(江苏依莱萨生物技术有限公司，批号：12676-029)；DMEM高糖培养基(北京科美生物技术有限公司，批号：12100046)；BCA蛋白定量试剂盒(上海赛默飞生物科技有限公司，批号：23221-23230)；SDS-PAGE试剂盒(上海如吉生物科技发展有限公司，货号：SJH0899)；PBS缓冲液(上海源叶生物科技有限公司，货号：R22379)；PVDF膜(上海易励医疗器械有限公司，批号：10600023)；缓冲液(北京普利莱基因技术有限公司，货号：B1009-TBST)；EGF-1R、ERK、Akt一抗(美国CST公司，货号：2366T、2305T、2314T)；羊抗鼠二抗(广州天骏生物科技有限公司，货号：A11001)；CCK-8试剂(北京富龙康泰生物技术有限公司，货号：FP-M-300)；Transwell小室(北京优尼康生物科技有限公司，货号：3422)。

1.3 仪器CO2培养箱(上海迈瑞尔化学技术有限公司，型号：H3-6815-02)；……