李招发 邱丹丹

（1. 华侨大学医学院，泉州 362021；2. 华侨大学生物医学学院，泉州 362021）

鱼精蛋白（protamine，Pro）是一种由30-50个氨基酸组成的多聚阳离子肽，以精氨酸为主，存在各类雄鱼成熟精巢组织与带负电的DNA紧密结合［1］。Pro抑菌作用具有广谱性、高效性和安全性。Pro对黄色葡萄球菌、酵母菌、霉菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌及四链球菌均表现为抑制效果，可作为绿色防腐剂应用于食品工业中［2-4］。现在普遍认为鱼精蛋白抑菌活性是由其分子中存在着大量精氨酸，精氨酸中的正电荷胍基与细胞壁肽聚糖的负电荷产生静电作用，但它们均能与细胞膜特异性结合，通过破坏细胞膜结构，从而导致整个细胞不能正常运行［5］。在手术中，Pro作为肝素抗凝血剂用于因肝素注射过量而引起的出血；还可以延迟或阻止胰岛素的释放［6-7］。Pro与 DNA 有较强的结合能力，作为DNA药物载体而被广泛应用［8-9］。

细胞珠蛋白（cytoglobin，CYGB）是 Kawada等［10］在大鼠肝星状细胞中发现的一种六配位血红素球蛋白，分子量为21.4 kD。研究表明CYGB具有过氧化物酶活性和清除氧自由基的功能，并能通过调控CYGB基因的表达抑制肝纤维化［11］。本课题研究表明，CYGB在原核表达系统中表达量极大，可借助CYGB蛋白来实现目的蛋白的高效表达［12］。鱼精蛋白的主要来源是天然提取，产量受限，且鱼精蛋白富含精氨酸，这样编码的氨基酸序列在大肠杆菌中是难以表达的［13］，严重制约了其应用。本研究旨在通过基因工程技术，通过CYGB融合表达，探索大量制备重组鱼精蛋白的可行性。……