熊亮斌 孙吉 刘显舟 屈占国 计雨情 徐一新 王风清

（1. 上海健康医学院协同科研中心/药学院，上海 201318；2. 华东理工大学生物工程学院，上海 200237）

甾体药物是仅次于抗生素的第二大类药物，具有抗炎、抗过敏、抗病毒和神经保护［1］等众多突出功效。目前，市售甾体药物达400余种，销售额超1 000亿美元，约占全球医药总销售额的10%，我国是甾体原料药及制剂的主要供应国，产量占世界1/3以上［2］。利用分枝杆菌等微生物代谢转化低值的植物甾醇（油脂加工废料、造纸废料等的回收提取物）［3］，获得甾体药物中间体的过程，是现行甾体药物生产工艺的基础步骤。通过对分枝杆菌内源甾醇代谢途径的阻断，可获得一系列具有重要价值的甾体药物中间体转化菌株，如C19甾体（雄甾-4-烯-3，17-二酮，AD；宝丹酮，BD；9α-羟基化-雄甾 -4-烯 -3，17-二酮，9-OHAD）［4-5］和 C22 甾体（22-羟基 -23，24-去甲胆甾 -1，4-二烯 -3-酮，4-HBC）［6］等。随后，结合化学及微生物转化，可获得包括肾上腺皮质激素、孕激素等几乎所有种类的临床用甾体药物［7］。

分枝杆菌可利用甾醇作为生长及生理代谢唯一的碳和能量来源［8-9］。通常，野生型分枝杆菌可完全降解甾醇，此过程无明显的中间代谢物积累［8-9］。当阻断甾醇代谢途径后，对甾醇底物的不完全降解，将导致9-OHAD等中间代谢物的大量积累。鉴于此类中间产物可能存在的细胞毒性，此时，转化菌株的呼吸、生长及生理代谢将发生一系列的适应性反应，以应对不利的细胞内外环境［10］。然而，聚焦于分枝杆菌转化甾醇过程的中心代谢途径相关研究尚有欠缺，有必要针对性探究此过程的内在调节机制。……