沙海滨 尹丽娥 马荣峰 徐佳鸿

(1胜利油田中心医院，山东 东营 257000；2山东省省立医院)

喉癌是成人头颈部常见的一种恶性肿瘤，喉鳞状细胞癌(LSCC)是该病主要的病理类型。目前研究认为喉癌是多种因素共同作用产生的结果，吸烟、饮酒、空气污染、病毒感染、性激素是其主要危险因素，这些危险因素引起了机体组织细胞内癌症相关因子的异常进而诱导肿瘤的发生〔1,2〕。miRNA是长度为23 nt左右的非编码类RNA分子，且其能与靶基因mRNA 3′非翻译区的的特异性相结合，并经过负性调控靶基因的转录表达，而参与到细胞增殖、凋亡、侵袭及迁徙等生物学的行为。因此其与多种疾病发生和发展紧密相关〔3,4〕。miR-126是一种位于表皮生长因子样结构域7的第7个内含子内的miRNA，在癌症中表达失调，并与肿瘤的血管生成、癌细胞增殖、侵袭、耐药等过程密切相关。目前研究显示miR-126在喉癌组织中低表达〔5,6〕，但具体机制未知，因此本研究分析miR-126对Hep2喉鳞状细胞的迁移及侵袭能力产生的影响及相关机制。

1 材料与方法

1.1试剂与仪器 DMEM培养基和胎牛血清均从美国Gibco公司购入；检测BCA蛋白浓度的试剂盒从南通碧云天生物公司购入；miR-126 mimics及miR-126 NC均从上海吉马生物公司购入；兔抗人基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、锌指转录因子(Snail)、锌指结合蛋白(ZEB)1蛋白、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化(p)-AKT及甘油醛-3的磷酸脱氢酶(GAPDH)相关多克隆抗体从美国的Abcam公司购入；用于提取Trizol总RNA的试剂盒和LipofectamineTM3000脂质体及反转录的试剂盒均从大连宝生物公司购入。Applied Biosystems7500型PCR仪从美国的ABI公司购入；……