李真 李婕 黄贤明 孟凡力

(青岛市中医医院(青岛市海慈医院) 1药剂科，山东 青岛 266011；2血管外科；3内分泌科)

骨关节炎常见于60岁以上老年人，其治疗以减轻疼痛、恢复和重建关节功能为主，骨关节的发生涉及炎症、细胞因子、软骨细胞凋亡等一系列复杂过程〔1〕。白细胞介素(IL)-1β是诱导骨关节炎发生的重要因子，可进一步加重细胞炎症损伤，促进细胞凋亡，造成骨关节破坏〔2〕。重楼皂苷Ⅶ是一种重楼的活性成分，有抗肿瘤、消炎、抗骨质疏松等作用〔3〕。重楼皂苷Ⅶ具有抗骨关节炎的作用，其治疗后的骨关节炎大鼠模型关节炎病理损伤明显改善，炎症因子水平降低〔4〕。现阶段尚不清楚重楼皂苷Ⅶ对IL-1β诱导的关节软骨细胞作用。本研究旨在探讨重楼皂苷Ⅶ对IL-1β诱导的关节软骨细胞凋亡和炎症介质释放的影响和机制。

1 材料与方法

1.1材料 细胞：人关节软骨细胞(武汉普诺赛生命科技有限公司，编号：CP-H096)，人关节软骨细胞培养在含有10%胎牛血清的DMEM-F12培养液中，细胞培养条件为37℃，5% CO2培养箱。药物：重楼皂苷Ⅶ(四川省维克奇生物科技有限公司，规格：20 mg，编号：wkq-00731，纯度：≥ 98%)。试剂与仪器：肿瘤坏死因子(TNF)-α含量检测试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司；兔抗c-myc抗体购自美国Abcam；IL-8含量检测试剂盒购自北京百奥莱博科技有限公司；兔抗诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)抗体购自美国Abcam；一氧化氮(NO)含量检测试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；兔抗β-连环蛋白(catenin)抗体购自美国Cell Signaling Technology；Wnt/β-catenin信号激活剂LiCl购自美国Sigma；兔抗剪切的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(酶切Caspase)-3抗体购自美国Abcam；……