王曼 宋智斌

(1邢台市人民医院耳鼻咽喉科，河北 邢台 054001；2邢台市信都区中心医院内科)

鼻咽癌是起源于鼻咽黏膜上皮细胞的恶性肿瘤，据统计全世界每年有5万人死于鼻咽癌，其中大多数患者来自中国南部和东南亚地区〔1〕。目前，放化疗是鼻咽癌患者的主要治疗方法，但由于晚期患者放化疗耐受及并发症的出现严重影响治疗效果，患者的5年生存率仍不理想〔2〕。因此，寻找安全、高效、低毒的抗肿瘤药物，提高临床鼻咽癌治疗效果是目前亟待解决的重大课题。仙鹤草又名龙牙草，为蔷薇科多年生草本植物，具有收敛止血，止痢杀虫、强心益气之功效，多用于治疗各种出血和脱力劳伤等〔3〕。研究发现〔4〕，仙鹤草具有较好的抗肿瘤活性，如仙鹤草水提液可显著抑制肺癌细胞A549增殖，诱导细胞凋亡；仙鹤草丙酮提取物正丁醇萃取层可诱导肝癌细胞BEL-7402内活性氧增加，促进细胞凋亡〔5〕，此外一定浓度的仙鹤草提取物对鼻咽癌有抑制作用〔6〕。但仙鹤草对鼻咽癌生物行为影响的具体机制鲜有报道。本研究探讨仙鹤草提取物对鼻咽癌细胞增殖抑制和凋亡促进及其作用机制。

1 材料与方法

1.1实验材料 鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2购于美国ATCC。(DMEM)培养基和胎牛血清购于美国Gibco公司；LipofectamineTM2000转染试剂购于Sigma公司；噻唑蓝(MTT)试剂盒和AnnexinV-FITC/PI试剂盒购于北京索莱宝公司；Western印迹相关试剂、二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒购于上海碧云天公司；兔源细胞周期素(Cyclin)D1多克隆抗体、兔源P21单克隆抗体和兔源GAPDH多克隆抗体购于Abcam公司，鼠源B细胞淋巴瘤(Bcl)相关X蛋白(Bax)单克隆抗体、鼠源Bcl-2单克隆抗体、辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔和羊抗鼠Ⅱ抗购于Santa Cruz公司。……