长链非编码RNA LINC00943对结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞迁移能力的影响及机制
2021-11-16朱杰华杜文胜陈莉陈光红罗军敏
朱杰华 杜文胜 陈莉 陈光红 罗军敏
(遵义医科大学 1附属医院医学检验科,贵州 遵义 563000;2检验医学院;3基础医学院免疫学教研室)
肺结核(TB)是一种由结核分枝杆菌侵及肺部而引起的慢性传染病,在我国患病率较高,近年来由于耐药菌株数量的不断增加,给TB治疗带来新的挑战〔1〕。长链非编码RNA(LncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的RNA分子,可参与细胞增殖、分化、凋亡等多种生物学过程〔2〕。有研究发现LINC00943参与多种肿瘤发生发展,可能成为潜在的治疗靶点〔3〕。然而,LINC00943在TB中的作用机制尚未明确。微小RNA(miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的非编码RNA,可通过靶向作用于靶基因的3′-UTR,在转录后水平调控基因表达,且可调控细胞增殖、细胞凋亡等生物学过程〔4〕。既往研究表明,miRNA在宿主-致病原作用网络中发挥作用,可调节感染后细胞免疫反应及限制细菌增殖〔5〕。已有研究发现miR-125b-5p在TB患者和结核分枝杆菌感染的细胞中高表达,参与TB的发生发展〔6〕。本研究通过使用结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞构建TB体外细胞模型,旨在探讨LINC00943对TB体外细胞模型细胞迁移能力的影响,为TB治疗提供新靶点。
1 材料与方法
1.1细胞与主要试剂 小鼠巨噬细胞(MH-S细胞系)和结核分枝杆菌(H37Ra菌株)均购自美国ATCC;胎牛血清(FBS)、青霉素、链霉素及RPMI1640培养基均购自美国Gibco公司;LINC00943的野生型(LINC00943-WT)和突变型(LINC00943-MUT)荧光素酶报告载体均由北京易科潘搏生物科技有限公司构建;pmirGLO荧光素酶报告系统质粒购自上海海吉浩格生物科技有限公司;LINC00943小干扰RNA(si-LINC00943)及阴性对照小干扰RNA(si-NC)由吉玛生物科技有限公司合成;……
