赵雅丽，李瑞方，熊丽娇，曾治平

（1.赣南医学院2019级硕士研究生；2.赣南医学院第一附属医院全科医学科；3.国家老年疾病临床医学研究中心赣南分中心，江西 赣州 341000）

脂肪干细胞（Adipose-derived stem cells，AD- SCs）是从脂肪组织中分离得到的一种具有异质性的间充质干细胞，它具有多种属性标记，可分化为多种类型的细胞，如脂肪细胞、肌细胞、软骨和骨细胞等［1-2］。ADSCs与骨髓间充质干细胞（Bone mesenchymal stem cells，BMSCs）相比，更容易获得，并且在采集时具有相对较低的供区发病率。单细胞转录表明ADSCs对比BMSCs来说是一种更可控的干细胞来源，在调节炎症方面更具优势［3］，且在促进体内外造血方面ADSCs也明显优于BMSCs［4］，ADSCs方便分离的特性和强大的体外增殖能力，也使得ADSCs在再生医疗领域中非常受欢迎［5-6］。本文就ADSCs的分离、培养与鉴定进行研究。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料 6周龄的雄性大鼠（由赣南医学院科研动物中心提供），操作前后符合《关于善待实验动物的指导性意见》［7］标准。优质胎牛血清（四季青无噬菌体内毒素），DMEM低糖培养基（Gibco），Trypsin-EDTA（0.25%phenol red），0.2%Ⅰ型胶原酶（Collagenase），磷酸盐缓冲液（PBS，自配），青霉素−链霉素（索莱宝），完全培养基（DMEM低糖完全培养基−初级）、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠、地塞米松、胰岛素、吲哚美辛、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、茜素红、油红O等。BBS-SDC医用洁净工作台、Thermo CO2培养箱、DK-8D型电热恒温水箱、TDZ5-WS台式低速离心机、BCD-601WDPR低温冰箱、流式细胞仪、倒置显微镜等（由赣南医学院第一附属医院科研中心提供）。

1.2 实验方法

1.2.1 ADSCs提取

1.2.1.1 胶原酶消化提取法 （1）取6周龄雄性大鼠，将大鼠脱颈处死，在无菌条件下取大鼠腹股沟处脂肪组织，用加入双抗的磷酸盐缓冲盐水（PBS）充分漂洗3～4遍，放入装有PBS的培养皿中，剔除肉眼可见的血管及筋膜组织。……