周燕霞， 金东芳

（金华市人民医院检验科，浙江 金华 321000）

肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）是引起院内感染的主要革兰阴性菌，可诱发一系列疾病，包括血流感染、呼吸道感染以及肝脓肿，重症监护病房中免疫功能受损的患者更易感染[1]。目前，碳青霉烯类抗菌药物（亚胺培南和美罗培南）是治疗肺炎克雷伯菌感染的主要药物，但随着此类药物的广泛使用，碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistantKlebsiella pneumoniae，CRKP）开始出现，甚至使临床面临无药可用的局面[2]。肺炎克雷伯菌可以形成生物膜，使抗菌药物难以渗透入细菌内发挥杀菌作用。因此，迫切需要寻找新的化合物或植物提取物，以解决这一难题[3]。单宁酸是从植物组织中（如茶叶）提取的具有抗菌和抗病毒活性的化合物。有研究结果表明，单宁酸对大肠埃希菌生物膜形成有一定的抑制作用，但对CRKP的作用仍未知[4]。本研究旨在通过分析单宁酸抑制肺炎克雷伯菌生物膜形成的机制，为临床控制CRKP感染提供参考。

1 材料和方法

1.1 菌株来源

收集3株分离自2019年金华市人民医院住院患者痰液样本的CRKP（KP1、KP2、KP3）和1株碳青霉烯敏感肺炎克雷伯菌（KP 13883），质控菌株大肠埃希菌（ATCC 25922）、肺炎克雷伯菌（ATCC 13883）购自国家卫生健康委临床检验中心。

1.2 仪器和试剂

荧光定量PCR仪（美国Thermo Fisher Scientific公司）；单宁酸（上海阿拉丁生化科技股份有限公司）；1%结晶紫粉末（美国Thermo Fisher Scientific公司）；S-3000N电子显微镜（日本HITACHI公司）。实时荧光定量PCR试剂盒（日本TOYOBO公司）；M-H肉汤（英国OXOID公司）；亚胺培南干粉、美罗培南干粉（上海广锐生物科技有限公司）。

1.3 体外药物敏感性试验

采用微量肉汤稀释法检测3株CRKP和1株KP13883对2种常用碳青霉烯类药物（亚胺培南和美罗培南）的敏感性。……