干扰lncRNA SBF2-AS1通过靶向调控miR-582-5p表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭*
2021-11-13张平弟吴永丰
张平弟,宣 佶,吴永丰
(1.东南大学附属中大医院江北院区,南京 210000;2.南京中医药大学,南京 210000)
乳腺癌是女性肿瘤中死亡率较高的恶性肿瘤,随着分子生物学和基因组学的发展以及精准医学的出现,分子靶向药物治疗成为乳腺癌的一种新型治疗方法[1]。靶向治疗的关键之一在于潜在治疗靶点的筛选,研究发现,非编码RNA(ncRNA)与乳腺癌的发生发展密切相关,可作为乳腺癌的潜在治疗靶点[2]。长链非编码核糖核酸(long non-coding Ribonucleic Acid,lncRNA)和微小RNA(microRNA,miRNA)均属于非编码RNA,与乳腺癌的发生发展、转移和预后相关,且lncRNAs 可与miRNA、信使RNA(messenger RNA,mRNA)或蛋白相互作用来调节相关基因的表达,从而影响乳腺癌的进展[3]。SBF2 反 义RNA1(SBF2 antisense RNA 1,SBF2-AS1)是一种新的lncRNA,SET结合因子2(set binding factor 2,SBF2)的反义RNA1,干扰SBF2-AS1可抑制宫颈癌细胞的增殖[4]。远处转移和复发是乳腺癌患者死亡的重要原因之一,而miRNA的异常表达与乳腺癌的转移及血管形成等密切相关[5]。生物学软件预测发现,SBF2-AS1 与miR-582-5p 有结合位点。研究报道,miR-582-5p可抑制骨肉瘤细胞的生长和侵袭[6],但miR-582-5p 对乳腺癌细胞的影响尚不清楚。本研究旨在研究lncRNA SBF2-AS1 对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制,现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 乳腺癌细胞MCF-7、SK-BR-3、MDAMB-231和正常乳腺细胞MCF10A购自中国科学院上海细胞库;RPMI-1640 培养基购自美国Gibco 公司;Trizol 试剂、荧光定量试剂盒购自日本TaKaRa公司;双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自武汉纯度生物科技有限公司;Transwell 小室、基质胶购于美国BD 公司;MTT 试剂盒、RIPA 蛋白裂解液购自上海碧云天生物技术有限公司。
1.2 细胞培养与分组 乳腺癌细胞MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231 和正常乳腺细胞MCF10A 用RPMI-1640 培养基常规培养;……
