周亚玲，阴 晴，王中新△

1.安徽医科大学第一附属医院检验科，安徽合肥 230022；2.江苏大学附属医院检验科，江苏镇江 212001

近年来，随着广谱抗生素的广泛使用，多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)分离率呈逐年上升趋势[1]，而其耐药性的形成与碳青霉烯酶的产生和外排泵过表达关系密切[2-3]。碳青霉烯酶中苯唑西林酶是鲍曼不动杆菌的主要碳青霉烯酶，特别是OXA-23在其中发挥主导作用[4-5]。B类金属酶在各地区的检出率存在明显的差异[6-7]，主要包括blaIMP、blaVIM、blaNDM等基因型。外排泵中的耐药结节细胞分化超家族(RND)[8]与MDRAB形成关系密切，AdeABC、AdeIJK和AdeFGH是其主要类型，其中任何一个外排泵的过度表达都会降低鲍曼不动杆菌对抗菌药物的敏感性[9]。本研究主要检测收集的鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和RND外排基因的携带情况，再应用实时荧光定量PCR(qPCR)测RND外排泵阳性菌株的adeB、adeJ和adeG表达水平，为及早识别耐药菌以及加强耐药菌的监测提供理论依据。

1 材料与方法

1.1实验菌株 所用菌株分离自江苏大学附属医院2016年7月至2018年6月微生物室保存的非重复性鲍曼不动杆菌101株，其中MDRAB71株，非多重耐药鲍曼不动杆菌(NMDRAB) 30株。参考菌株鲍曼不动杆菌ATCC19606购于国家卫生健康委员会临床检验中心。

1.2主要仪器 Real-Time PCR仪、普通PCR扩增仪和凝胶电泳成像分析系统均购自美国Bio-Rad公司；水平电泳套件购自上海天能生物公司；NanoDrop1000分析仪为美国Termo公司产品；恒温水浴锅购自嘉兴俊思电子有限公司；气浴恒温振荡器购自江苏科技仪器有限公司。

1.3主要试剂 血琼脂平购自郑州安图生物公司；……