潘劲超，张 恒，李惠虹，郑克雷，薄震宇，任 琦，黄佳敏，方 追，刘欣超，顾有方，李文超

(安徽科技学院 动物科学学院 动物营养调控与健康安徽省重点实验室，安徽凤阳 233100)

毛滴虫是一类属于副基体门的原虫，以寄生或共生形式、厌氧生活在宿主胃肠道或生殖道，多有3根～5根前鞭毛、氢酶体、副基体及复杂的细胞骨架等结构[1-2]。猫毛滴虫感染已报道的虫种有寄生于猫肠道的胎儿三毛滴虫(Tritrichomonasfoetus)和人五毛滴虫(Pentatrichomonashominis)及寄生于猫口腔中的口腔毛滴虫(Trichomonastenax)、布里克西毛滴虫(Trichomonasbrixi)和猫四毛滴虫(Tetratrichomonasfelistomae)等[2-3]。T.foetus是引起猫毛滴虫病的病原，临床上以慢性大肠性腹泻为特征[4]。分子分析显示牛和猫T.foetus分离株在遗传上有一定差异，分属于T.foetus的“牛基因型”和“猫基因型”[4-5]。猫作为伴侣动物，与人接触密切，这引发了人们关于猫是否可引起毛滴虫人兽共患传播风险的担忧。

1 发现历史

猫毛滴虫的研究可追溯到20世纪20年代，Da Cunha A M和Muniz J将其命名为猫毛滴虫(Trichomonasfelis)。1996年,Romatowski J基于光镜观察，把猫粪中的滴虫鉴定为P.hominis；2001年Levy MG首次用分子方法证实T.foetus才是猫滴虫性腹泻的真正病原[6-7]。

2 病原与生活史

毛滴虫仅有滋养体阶段，通过纵二分裂进行繁殖，不同虫种滋养体形态相似，均呈纺锤形或泪滴状，具特定数量的前鞭毛和1 根与波动膜边缘连接的后鞭毛，虫体运动活泼[1]。其中，T.foetus有3根前鞭毛，P.hominis有5根前鞭毛，T.tenax有4根前鞭毛。目前认为猫T.foetus主要经粪-口途径传播，而寄生于口腔的毛滴虫通过飞沫或接触传播[3,6,9]。

3 致病性

3.1 胎儿三毛滴虫

猫毛滴虫病作为一种新发的猫胃肠道疾病，其发病机制尚不明确。自然感染情况下，T.foetus主要定植在黏膜表面，并与盲肠和结肠的表面上皮接触。人工感染试验可观察到虫体定植在猫回肠末端、盲肠和结肠。体外研究表明，T.foetus可经特异性配体-受体互作直接黏附在单层肠上皮细胞上[10]。半胱氨酸蛋白酶似乎可介导虫体在肠黏膜上皮的黏附和细胞毒作用，未来可作为改善该病临床症状的治疗目标[11]。

3.2 口腔毛滴虫

T.tenax感染多见于口腔卫生较差或具牙周疾病的人群[3]。虽然T.tenax具较高蛋白水解活性，可破坏寄生部位黏膜和组织，但普遍认为其与宿主是一种共生关系[9]。

4 临床症状

猫毛滴虫病临床症状多变，感染较轻时呈亚临床症状，严重感染时出现慢性顽固性腹泻。人工口服攻虫后，猫可出现慢性或间歇性腹泻，粪便呈半成形，半流质或液态，黄绿色，恶臭，有时有粪便带血、黏液，大便失禁、里急后重，肠胃胀气等症状，可持续2 d～7 d。严重感染病例，会出现明显肛门炎症和直肠脱垂等[1,6]。上述临床症状多呈间歇性，在使用药物治疗后好转，停药后可复发[12]。

5 流行

5.1 猫肠道毛滴虫

猫T.foetus呈全球流行，猫T.foetus感染率为0～81.8%，见表1[6]。不同的研究者调查时采用的方法不尽相同，早期的调查多采用培养法和直接涂片镜检，近期多采用分子方法，一些国家仅有猫T.foetus病例报道，尚无猫群中T.foetus流行的相关数据可供参考[13]。现有研究中，调查样本来源多样，如采集自腹泻猫、参加会展的猫、寄养猫、或兽医诊所就诊猫等，有的样本有临床症状，有的无临床症状等，因此现有流行数据可能存在与此类样本、调查方法等相关联的偏差[13]。一些早期病例报道中，曾把T.foetus误判为P.hominis。近期关于猫P.hominis流行的报道也不多，目前仅见日本宠物店猫P.hominis感染率为0.5%(2/409)，国内某动物医院门诊猫P.hominis感染率为5.3%(3/57)，且存在T.foetus和P.hominis混合感染，混合感染率为3.5%(2/57)[15-16]。

表1 全球猫T.foetus流行情况

5.2 猫口腔毛滴虫

Kellerov P和Tachezy J[3]报道捷克猫T.tenax感染率为4.1%(5/111)，T.brixi感染率为6.6%(7/111)。Dybicz M等[5]报道波兰猫T.tenax感染率为2.1%(3/142)。

6 诊断

常用的诊断毛滴虫病的方法有直接湿片镜检法、粪便培养法和PCR法。毛滴虫滋养体对环境较敏感，其诊断对粪便样本有较高的要求。待分析粪便必须新鲜、无污染，且测试前不要冷冻。最好采集刚排出的新鲜粪便或用粪圈或结肠冲洗技术人工提取粪便[1,6,17]。如样本需运输，可用盐水(每2 g粪便用3 mL生理盐水)稀释，防止干燥以延长毛滴虫存活时间。为提高检测敏感性，粪便样品最好在6 h内分析完毕，如超过6 h，会降低检测敏感性[1]。非腹泻猫的粪便或干结粪便，不适合用于毛滴虫检测，因即使存在感染，也很少会有阳性结果。在猫服用抗生素的情况下采样，会降低毛滴虫检出率，因此在采样前，最好提前几天停用任何类型的抗菌治疗[1]。

6.1 直接湿片镜检法

将少量粪便用生理盐水稀释后，盖上盖玻片，置200×或400×镜下检查，即“湿片”法。观察时，可根据滋养体形状和运动特点发现虫体，一旦虫体不运动或死亡，则很难检出。该法操作简单、成本低，但检测敏感度较低，其中人工感染猫检出率低于2%，自然感染猫检出率约4%。实践中，可用新鲜、非冷藏(冻)和腹泻猫粪便及多次涂片检查等提高检出率[6]。此外，该法不能区分T.foetus和P.hominis等不同毛滴虫虫种，同时因T.foetus滋养体大小与贾第虫包囊大小相似，容易混淆，镜检时要注意排除干扰。 对T.tenax，则直接取猫口腔刮取物，用生理盐水稀释、涂片后镜检。

6.2 粪便培养法

如粪便经多次镜检仍为阴性，可用商业化的In Pouch TF培养基进行虫体培养。该法仅需少量粪便(米粒大小即可)，敏感性比直接镜检高，自然感染猫检出率约55%。因贾第虫不能在该培养基上生长，可排除贾第虫包囊对结果的干扰[1]。但该法耗时较长，需几天时间让虫体增殖以提高检出率，且该法也不能区分不同毛滴虫虫种。此外，也可用Diamond或改良Diamond培养基等对粪便进行培养后检测。

6.3 PCR方法

目前，已发展了多种检测猫毛滴虫的PCR方法，主要扩增的靶基因为毛滴虫5.8S rRNA的ITS1和ITS2区。最常用的方法是巢式PCR法，第一对引物为TFR3和TFR4(扩增347 bp的片段)，第二对引物为TFITS-F和TFITS-R(扩增208 bp的片段)[18]。已证实引物对Th3/Th5是P.hominis特异的，在其基础上发展出的单轮和巢式PCR方法是较为常用的方法[22-23]。Kikuta N等[21]发展了一种特异检测T.tenax的PCR方法。PCR方法的敏感性和特异性均优于粪便培养法和直接湿片镜检法，所需时间比培养法短，且不要求必须是活虫体，死亡虫体也可检测，可检测至最低10个虫体/100 mg粪便[22]。但因粪便成分复杂，如多糖复合物、胆盐、血红蛋白降解产物、酚类化合物和重金属等PCR抑制剂常与虫体DNA共同提取，会降低检测的敏感性，导致出现“假阴性”[6]。

6.4 组织病理学方法

组织病理学法可作为检测肠组织中P.hominis/T.foetus滋养体的一种诊断方法，但因滋养体极其脆弱，很难保存在活检标本中，因此检测结果并不准确[6]。使用该法时，对同一样本，需检查至少6个组织切片，以获得至少95%的置信度[1]。免疫组织化学、荧光原位杂交与显色杂交技术也可应用于组织标本中毛滴虫的检测，但不易推广应用。

7 治疗

通常治疗人阴道毛滴虫等肠道原虫的药物，如甲硝唑和替硝唑，在治疗猫毛滴虫病时效果不佳。罗硝唑(RDZ)是迄今唯一已证实对猫T.foetus有效的药物，通常按每天20 mg/kg～30 mg/kg剂量口服，连用14 d[1]。在用RDZ治疗期间，大多数感染猫的粪便稠度能快速改善，一般在治疗2周后正常[1]。但一些结肠损伤严重的病例，治疗数周腹泻仍不见好转。因从肠道彻底清除毛滴虫难度较大，用RDZ治疗后，毛滴虫病可能会复发，但经多次治疗的猫可痊愈[23]。用芬苯达唑、帕罗霉素、替硝唑和甲硝唑等治疗毛滴虫病时，治疗期间，猫粪便状况有所改善，但停药后腹泻经常重现[6]。有报道显示猫毛滴虫可对RDZ产生抗药性，但感染猫群中抗药性虫株的流行情况不甚清楚[24]。高剂量应用RDZ，可使猫产生食欲减退、颤抖、虚弱、共济失调和感觉过敏等副作用。因副作用的存在，只有在已明确确诊为毛滴虫感染的病例、且已征得猫主人同意，才建议应用RDZ治疗[12]。

目前报道的其他治疗猫毛滴虫病的方法较少。许多有效治疗腹泻的办法如改变饮食，使用不同类抗菌素、益生菌和营养补充剂等，对治疗猫毛滴虫病效果均不明显[25]。

8 预后

猫毛滴虫病的预后往往良好，感染T.foetus的猫仍可保持正常身体条件和生理状态。88%的腹泻猫，其粪便可在感染2年后自然恢复正常。平均腹泻持续时间为135 d。然而，T.foetus感染很难自发消除，暗示猫很难对T.foetus感染产生有效的免疫反应，约54%的猫存在持续感染或再次感染，或间歇性腹泻反复发作等，推测可能与应激或肠道菌群变化相关。此外，慢性感染可能会使部分猫发展为炎症性肠病[6,12]。

鉴于猫毛滴虫病预后良好，当感染发生后，治疗与否成为一个必须抉择的问题。欧洲猫科疾病咨询委员会推荐，仅当腹泻的猫经直接湿片镜检和粪便培养后镜检为毛滴虫阳性时，建议进行治疗[1]。很多猫感染后无临床症状，但其可能成为潜在的传染来源。因此，建议所有经检测毛滴虫阳性的猫，无论有无症状，均应进行治疗，以尽量减少该病的传播。

9 预防

因应激或免疫功能发育不成熟，在拥挤环境中饲养的小猫更易发生T.foetus感染。因此，减少应激，避免密集饲养，以尽量减少接触或感染T.foetus的机会。此外，应对所有被T.foetus污染的猫舍、床、被褥、运输箱、垃圾箱等进行彻底消毒，以杀死污染的滋养体[6,12]。

10 展望

猫毛滴虫病作为一种猫的新发传染病，已引起兽医界的关注。目前对该病的研究远未达到预期，尤其急需有效、安全的治疗办法。继续开展猫毛滴虫病的病原学、流行病学、传播模式、致病性、人兽共患潜力等研究，有助于更全面的掌握其情况，从而为防控奠定基础。