李小凤，谢芝勋，范 晴，谢志勤，谢丽基，黄娇玲，张艳芳，曾婷婷，王 盛，罗思思，李 孟，邓显文

(广西兽医生物技术重点实验室，广西兽医研究所，广西南宁 530001)

白细胞介素2(lnterleukin-2，IL-2)是Ⅰ型细胞因子家族的一员，最初被称为T淋巴细胞生长因子，具有广泛的生物学活性，在机体免疫过程中发挥重要作用[1-3]。IL-2能促进CD4+和CD8+T淋巴细胞增殖，增强自然杀伤细胞(NK细胞)和单核细胞等的杀伤活性[4-5]。以IL-2作为免疫佐剂，与人乳头病毒(HPV)疫苗共同使用可提高疫苗的免疫效果[6]。在体内，IL-2因子增强牛对乳房炎[7]、结核病[8]和疱疹病毒感染[9]的抵抗力，提高了机体的抗病毒功能。过表达IL-2蛋白，可以降低鸡新城疫病毒载量[10]和提高对人乳腺癌细胞的杀伤力[11]。可见，IL-2在疾病的防治中发挥着重要作用。

基于IL-2的重要功能，人和多种哺乳动物的IL-2相继在体外成功表达[12-14]，并作为商品化药物广泛应用于疾病治疗。水牛在广西有重要的经济地位，近年来规模化养殖增加，一些县市对养牛业非常重视，由病毒感染引起的牛病毒性传染病综合防控存在短板，新药的研发有待突破。因此，对水牛IL-2的研究具有很高实用价值。本研究旨在体外表达水牛IL-2，以期为研发重组水牛IL-2治疗性生物制剂奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 组织、病毒及细胞 水牛新鲜脾脏采自广西南宁某屠宰场；牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛肾细胞(MDBK细胞)由广西兽医生物技术重点实验室保存。

1.1.2 主要试剂 核酸提取试剂TRIzol试剂盒、IL-2山羊源多克隆抗体，美国Invitrogen公司产品；pMD-18T载体、T4 DNA连接酶、Hind Ⅲ与BamH Ⅰ限制性内切酶，宝生物工程(大连)有限公司产品；……