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上海市2株蚊源盖塔病毒的分离鉴定及分子特性分析

2021-11-11钟登科李尚同张俊杰秦爱建

畜牧与兽医 2021年11期

钟登科,李尚同,张俊杰,秦爱建

(1. 扬州大学兽医学院,江苏 扬州 225009;2. 上海农林职业技术学院,上海 201600;3. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241)

盖塔病毒(Getah virus,GETV) 是一种由吸血节肢动物传播的单股线状RNA病毒,属披膜病毒科(Togaviridae) 甲病毒属(Alphavirus)成员[1-2],该病毒可以引起猪的流产、马的发热皮疹和淋巴结肿大[3-5]。此外该病毒也感染人类,一些研究表明在马来西亚、澳大利亚和中国的健康人和发热患者的血清标本中检测到GETV中和抗体[5-7]。

1955年首次在马来西亚的雪背库蚊中分离到GETV MM2021株[8]。至今已陆续在日本、澳大利亚、中国、蒙古国和俄罗斯等13个国家或地区的蚊媒和发病动物(马或猪)的组织或血液中分离到GETV[9]。我国于1964年首次在海南蚊媒中分离到GETV M1株[10],以后陆续在中国多个省市的蚊媒和动物样品中检测并分离到多株GETV。本研究对2018年7月采集自上海市浦东新区和奉贤区马场的蚊子样品进行检测,从中华按蚊、三带喙库蚊样本中成功分离得到2株GETV,命名为SH201801、SH201802。对其E2蛋白的基因序列进行测定和分析,了解分离株的遗传变异情况,以期为上海地区GETV感染的防控提供重要的科学依据。

1 材料与方法

1.1 细胞及主要试剂

白蚊伊蚊卵细胞(C6/36)和金黄地鼠肾细胞(BHK-21)均由中国农业科学院上海兽医研究所传代保存。蚊媒样品是于2018年7月18:00至次日6:00采用利用紫外捕蚊灯在上海市浦东新区和奉贤区多个马场采集的蚊虫,共捕获成蚊6 864只。QIAampR Virus RNA Mini Kit购自Qiaqen公司;兔抗GETV E2蛋白多克隆抗体由中国农业科学院上海兽医研究所马志永研究员馈赠,荧光素标记羊抗兔抗体(FITC-IgG)购自Sigma公司。……

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