2株J亚群禽白血病病毒毒株的分离鉴定及全基因组序列分析
2021-11-11郭雨欣游广炬李晓齐郑世军王永强
郭雨欣,游广炬,李晓齐,高 丽,郑世军,王永强
(中国农业大学动物医学院 农业部动物流行病学重点实验室,北京 海淀 100193)
禽白血病是由反转录病毒科反转录病毒属的禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起的一种肿瘤性疾病,可以造成鸡的免疫抑制及生长迟缓,给养鸡业带来了巨大的经济损失[1-3]。根据ALV囊膜糖蛋白抗原性可将其分为7个亚群,分别为A、B、C、D、J、K亚群及E亚群,其中E亚群为内源性病毒,一般没有致病性或致病性很弱[2]。J亚群ALV是我国目前流行范围最广,带来经济损失最大的禽白血病病毒[4]。自1999年我国首次从鸡场病鸡中分离出ALV-J以来,ALV-J迅速在全国各地流行[5-7]。近年发现流行的ALV-J的囊膜基因发生了多处碱基突变,并出现J亚群与其他亚群病毒产生重组毒株的现象,给ALV防控带来了新的挑战[8-10]。
2019年12月和2020年7月,河北某鸡场的地方品系鸡群中先后发生2起疑似禽白血病的疫情,本试验采集病鸡的血浆和组织病料,通过接种DF-1细胞,分离出2株禽白血病病毒,经鉴定这2株病毒均为J亚群毒株,分别命名为CAU2019和CAU2020。通过克隆获得这2个毒株的全基因组序列,并对其核苷酸序列进行同源性分析及构建长末端重复序列(LTR)、gp85基因的遗传进化树,为更好的了解我国目前ALV流行毒株的进化趋势,以及ALV的防控和净化提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料 血浆和病料组织样本分别于2019年12月和2020年7月采集自河北某鸡场地方品种鸡。禽白血病病毒ELISA抗原检测试剂盒,购自动物用生物制品国家工程研究中心(NECVB);DF-1细胞、禽白血病病毒P27单克隆抗体,由本实验室保存;……
