禽流感病毒(H9亚型)重组CHO细胞258株的构建及鉴定
2021-11-10梁宛楠
饲料博览 2021年10期
关键词:检测
宋 扬,于 镭,梁宛楠,李 倩
(哈药集团生物疫苗有限公司,哈尔滨 150069)
禽流感(Avian influenza,AI)是由禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起的一种以全身性败血症和呼吸系统疾病为特征的人兽共患传染病。根据致病性和毒力不同,AIV可分为非致病性禽流感(NPAIV)、高致病性禽流感(HPAIV)和低致病性禽流感(LPAIV)。HPAIV以死亡率高和传播范围广为主要特征。H9 亚型禽流感为LPAIV,感染后不会导致群体大批死亡,但是感染率较高,感染后会引起禽类呼吸困难、采食下降、产蛋率下降等临床症状,且易继发其他疾病。同时,流感病毒变异速度极快,极有可能由原来的低致病性禽流感进化为致病能力更强的毒株。国际检验兽疫局(OIE)已将禽流感定为A类传染病,我国农业农村部将其列为甲类监测传染病。目前禽流感疫苗主要有灭活疫苗和减毒活疫苗。灭活疫苗主要诱导机体产生体液免疫应答,不能抵抗异源毒株的感染,长期使用易导致不同亚型抗原间的重排和抗原变异,常出现免疫失败的现象。减毒活疫苗仍存在活病毒成分,有返毒风险,且疫苗的保存、成本和运输条件要求较高。为了弥补传统疫苗不足,利用基因工程重组技术开发新型有效的疫苗是十分必要的。
本研究以“禽流感病毒(H9 亚型)258 株”为模板,以AIV 的HA 基因的胞外域与3 个重复串联的M2 蛋白胞外域为靶基因,插入真核表达载体pCIGS 中,构建了含有HA-M2e 基因的重组质粒,并转染CHO 细胞,经加压筛选获得重组高度表达HA-M2e 蛋白的重组CHO 细胞株。以期为禽流感病毒(H9亚型)重组疫苗的研制奠定基础。……
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