曾赛凡， 王雪丹， 陈余朋， 张 声， 王行富

胸膜原发性或转移性恶性肿瘤、各种炎症性病变或肺内病变累及到胸膜时，影响脏/壁层胸膜间皮细胞的液体和蛋白的重吸收及间皮下淋巴管内液体循环，均会导致胸膜腔内液体积聚而形成胸水[1]。恶性胸水呈肉眼血性，含有不同数量的红细胞，掩盖肿瘤细胞，对样本的形态学诊断及后续的免疫细胞化学染色和分子检测等辅助诊断均造成困难。本研究拟探讨离心分层取材法在血性胸水富集瘤细胞中的应用，以提高肿瘤细胞的检出率。

1 临床资料

1.1 材料 收集2019年10月—2020年6月笔者医院诊断为肺腺癌的患者50例，男性33例，女性17例，年龄(45.50±6.50)岁(43～65岁)。所有患者的影像学显示胸膜腔播散产生胸水，超声定位下抽取胸水，留取未经固定的新鲜血性胸水样本。

1.2 方法 收到的样本立即去除肉眼可见的蛋白、血凝块等。分两组进行细胞块制备：

1.2.1 直接离心沉淀法(A组) 摇匀样本取两管各50 mL，2 500 r/min离心5 min，直接取管底沉淀物。

1.2.2 离心分层取材法(B组) 摇匀样本取两管各50 mL，2 500 r/min离心5 min，肉眼观察上清液与沉淀物的分层情况，有分层的再次观察沉淀物大小及移动情况。沉淀物<2 mL，取全部管底沉淀物；沉淀物>2 mL且固定在管底不移动，取沉血表面物；会移动的可行沉淀物与破红液(10%中性缓冲福尔马林与50%乙醇等量混合液[2])1∶1混匀破红处理；无法分层的取10 mL样本与破红液按1∶4混匀破红，均取破红析出物。

两组材料获得的管底沉淀物、沉血表面物、破红析出物等沉淀物均加入10%中性缓冲甲醛50 mL悬浮固定5 min，1 500 r/min离……