李茜茹，邢 凯，苏 月，李博宇，苏运泽，王春伟，郭 勇，肖龙菲，齐晓龙，盛熙晖，倪和民，王相国*

（1.北京农学院动物科学技术学院，北京 102206；2.新疆生产建设兵团第七师畜牧兽医站，新疆乌鲁木齐 830000）

胎盘是妊娠期间维持胎儿生长发育的器官，由胎盘滋养层细胞、毛细血管内皮细胞及二者之间的基膜构成[1]。早期绒毛组织中主要为滋养层细胞（Trophoblast Cell）[2]，在胎盘发育中起着关键作用。滋养层细胞在桑葚胚时期形成，后分化形成细胞滋养层细胞（Cytotrophoblast Cells）和绒毛外滋养层细胞（Extravillous Trophoblast Cells，ETCs）。细胞滋养层细胞继续形成合体滋养层细胞，参与营养、分泌和代谢等过程[3]；绒毛外滋养层细胞主要通过迁移和侵袭作用侵入子宫内膜，在胚胎附植、血管重塑[4]及胎盘形成等方面均有重要作用。因此，滋养层细胞异常形态及功能障碍往往是导致不良妊娠结局的诱因[5]。

王专家等[6]探索了绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的体外分离培养方法并进行了细胞鉴定。赵志文等[7]采用联合消化法对牦牛胎盘滋养层细胞进行分离纯化，优化培养体系。目前很多研究通过体外培养获取该细胞后，继续传代培养依旧受到很大限制。端粒酶的过度表达与细胞癌变及细胞永生有关。有研究将人端粒酶逆转录酶（Human Telomerase Reverse Transcriptase，hTERT）基因导入正常细胞中，利用端粒酶异常表达，使细胞获得旺盛的增殖能力[8]。这一研究为导入hTERT基因延长细胞生长周期提供了可能。本研究尝试将外源hTERT基因导入原代牛胎盘滋养层细胞，使其获得更强的增殖能力，并通过多种方法鉴定其生物学特征，以获得更有效的体外培养细胞，从而为后续实验提供参考。……