陈褚建

（浙江省湖州市食品药品检验研究院，浙江 湖州 313000）

庆大霉素普鲁卡因维B12颗粒为复方制剂，具有消炎、止痛、促进胃黏膜修复等作用，主要用于治疗慢性、浅表性胃炎，其组分为硫酸庆大霉素、盐酸普鲁卡因和维生素B12，其中维生素B12为形成消化道正常上皮细胞的必需物质。该产品现行质量标准［1］中缺少针对维生素B12的检测控制。本研究中参考2020 年版《中国药典（四部）》［2］含量均匀度检查法项下方法及文献［3－16］，建立高效液相色谱法测定庆大霉素普鲁卡因维B12颗粒中维生素B12的含量及含量均匀度，以进一步完善该制剂的质量标准。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

1260 型高效液相色谱仪（美国Agilent 公司）；XS205 Dual Range 型分析天平（瑞士Mettler Toledo 公司，精度为0.01 mg）；KQ－500DB 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试药

维生素B12对照品（中国食品药品检定研究院，批号为100248－201705，含量为90.5%）；庆大霉素普鲁卡因维B12颗粒（企业A，批号分别为20190649、20190823，20190838）；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

1.维生素B12A.对照品溶液 B.供试品溶液 C.阴性对照品溶液图1 高效液相色谱图1.Vitamin B12A.Reference solution B.Test solution C.Negative reference solutionFig.1 HPLC chromatograms

色谱柱：Alltima C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：0.02 mol／L 磷酸二氢钠－甲醇（80∶20，V／V）；流速：1.0 mL／min；检测波长：361 nm；柱温：35 ℃；进样量：50 μL。

2.2 溶液制备

取维生素B12对照品27.56 mg，置250 mL 容量瓶中，加流动相溶解并定容，摇匀，即得对照品贮备液；精密量取1 mL，置100 mL 容量瓶中，加流动相定容，摇匀，即得对照品溶液。取样品5 袋，研细，精密称取适量（相当于维生素B120.02 mg），置100 mL 容量瓶中，加流动相溶解并定容，摇匀，即得供试品溶液。按庆大霉素普鲁卡因维B12颗粒处方和工艺，制备缺维生素B12的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。……