龚春燕，毛成健，敖华蓉，胡大军，张永峰

（湖北省宜昌市第二人民医院，湖北 宜昌 443002）

连翘有清热解毒、消肿散结等功效，所含萜类、酚类、黄酮类等化学成分均具有良好的抗菌活性［1－3］。头孢他啶为半合成的第3 代头孢菌素类抗菌药物，抗菌谱广，杀菌力强，对酶稳定性较高。本研究中通过测定连翘提取物联合头孢他啶作用下的抑菌环直径，研究其体外抗菌作用，为临床中西药合用，增强抗菌疗效，减少抗菌药物滥用所致不良反应提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

仪器：5415D 型3K 低温离心机（德国Eppendorf 公司）、HH－W420 型水浴恒温振荡器（江苏省常州市金坛友联仪器研究所）、AL204－IC 型电子分析天平（瑞士Mettler Toledo 公司）。

试药：连翘药材（金国源中药饮片有限公司）；连翘提取物（笔者自制）；头孢他啶（齐鲁制药集团，批号为20200302）；头孢他啶纸片、头孢他啶＋棒酸纸片（上海桥星贸易有限公司，每片直径均为6 mm，均含头孢他啶30 μg）；MH 培养基、琼脂糖培养基、LB 培养基（广东环凯微生物科技有限公司）。

受试菌：3 株产超广谱β 内酰胺酶（ESBL）临床分离株，源自三峡大学；铜绿假单胞菌ATCC25672，金黄色葡萄球菌ATCC26762，大肠埃希菌ATCC67788，均由三峡检验检测中心提供。

1.2 方法

1.2.1 最低抑菌浓度（MIC）检测

采用滴定法。取3 种待测菌株，接种于10 mL LB 液体培养基中，37 ℃摇床过夜，取适量菌原液，制备1 mL菌悬液，取500 μL 以1∶5 稀释。称取连翘提取物10 g，以60%乙醇溶解并稀释至10 mL，0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，得质量浓度为1 g／mL 的连翘提取物溶液，加入菌悬液，以无菌PBS 为空白对照，于600 nm 波长处测定吸光度，再取100 μL 以10 倍梯度稀释，孵育，分离，备用。……