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顶空-气相色谱法测定反刍动物瘤胃液中挥发性脂肪酸含量

2021-11-02王俊红高歌张圆圆单颖董伟仁

浙江大学学报(农业与生命科学版) 2021年5期

王俊红,高歌,张圆圆,单颖,董伟仁

(浙江大学动物科学学院,杭州 310058)

挥发性脂肪酸(volatile fatty acids,VFA)也被称为短链脂肪酸,是碳水化合物在反刍动物瘤胃内经多种微生物发酵后产生的主要产物。反刍动物体内的VFA 主要为乙酸、丙酸、丁酸,占VFA 总量的90%~95%[1],其所提供的能量约占反刍动物所吸收利用营养物质总能量的2/3[2]。因此,开展VFA的测定对研究反刍动物瘤胃发酵、提高饲料营养吸收和能量转化率具有重要意义。

目前,VFA 的检测方法主要包括气相色谱法[3-5]、高效液相色谱法[6]、原子吸收分光光度法[7]和毛细管电泳法[8]等,其中以气相色谱分析法最为常用。气相色谱法具有可靠性高的优势,但其需要离心、滤膜过滤等复杂的样品前处理过程。另外,复杂的反刍动物瘤胃液成分容易对色谱仪的进样口和色谱柱造成污染,降低分析的准确性,缩短色谱柱的使用寿命,增加维护成本[9]。顶空进样法是利用顶空技术(气体萃取),对复杂基质样品中的短链物质进行分析的方法[10-11]。该方法无需复杂的样品前处理过程,即可用于样品的定性及定量分析,在测定反刍动物瘤胃液VFA时具有独特的优势,避免了非挥发性成分对分析造成的干扰,减少了仪器污染,弥补了气相色谱检测法的缺陷。

本文建立了顶空-气相色谱(headspace-gas chromatograph, HS-GC)检测反刍动物瘤胃液中挥发性脂肪酸的分析方法。该方法不需要进行样品前处理,简单快速,重现性好,准确度高,可进行广泛应用。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

HSS 86.50 顶空进样器(意大利DANI 公司);……

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