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胡萝卜软腐果胶杆菌lux发光菌株的构建和应用

2021-11-02钟灵坤徐翠虹黄泽铭安千里梁岩

浙江大学学报(农业与生命科学版) 2021年5期
关键词:信号检测

钟灵坤,徐翠虹,黄泽铭,安千里,梁岩

(浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所/农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室,杭州 310058)

细菌性软腐病是世界范围内重要的细菌性病害,其病原物主要是果胶杆菌属(Pectobacterium)和狄克氏菌属(Dickeya)的细菌,其中胡萝卜软腐果胶杆菌(P. carotovorum)的寄主十分广泛,包括重要经济作物和一些观赏性花卉等,还可造成蔬果腐烂,导致严重的产后损失[1-2]。在田间及仓储环境中,高湿度有利于细菌性软腐病的发生。胡萝卜软腐果胶杆菌在20~35 ℃之间具有较高的致病力,在50 ℃以上无法存活[3-4]。胡萝卜软腐果胶杆菌一般通过伤口和自然孔口侵入寄主,侵染初期能明显观察到水渍状病斑,然后病部迅速扩展,最终导致侵染部位腐烂,整株植物萎蔫[5]。胡萝卜软腐果胶杆菌是一种死体营养型细菌,相对于活体和半活体营养型细菌的研究,其致病机制以及植物的抗性机制都不是很清楚,还有待进一步研究。

植物病原细菌的检测方法包括平板菌落计数法、生理生化法、血清学和核酸定量法。目前针对胡萝卜软腐果胶杆菌,常用的方法是平板菌落计数法和核酸定量法,但这2 种方法都需要首先获取植物发病部位,然后破碎植物组织,稀释涂板统计菌落数或提取核酸再扩增。而胡萝卜软腐果胶杆菌接种后,通过分泌果胶裂解酶、聚半乳糖醛酸酶和纤维素酶等多种细胞壁降解酶造成叶片快速坏死腐烂,出现症状时往往发病已经很重,甚至很多叶片掉落在土壤中,导致取材困难,难以精确定量[6]。……

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