槲皮素的抗炎免疫及部分机制研究
2021-10-29司丽君王林林
司丽君 王 雪 王林林 黄 华
新疆维吾尔自治区药物研究所,新疆乌鲁木齐 830004
槲皮素(分子式:C15H10O7)是一种在植物中广泛存在的黄酮类化合物[1],其具有抗肿瘤[2]、抗氧化[3]、抗炎[4]、抗病毒[5]、免疫调节[6]等多种药理活性。槲皮素也是新疆一枝蒿[7]、滨蒿[8]、天山雪莲[9]、金莲花[10-11]、沙棘[12]、沙枣[13]等具有抗炎作用的新疆地产民族药的成分之一。研究表明,槲皮素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7 细胞释放的一氧化氮、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6 和IL-1β 有显著的抑制作用[14-16],且槲皮素可以增强免疫低下小鼠的免疫力[17],但其对活性氧(reactive oxygen species,ROS)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP1)和环氧合酶(cyclooxygenase,COX)的体外抑制作用,以及对正常小鼠免疫功能的影响少见报道。本研究通过进一步考察槲皮素对ROS、MCP1 和COX 的影响,并观察槲皮素对正常小鼠脾淋巴细胞、T 细胞和B 细胞增殖的影响,探讨槲皮素的抗炎和免疫调节作用,以期为槲皮素在炎症及免疫疾病中的临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 细胞株及动物
RAW264.7 细胞购自中国科学院上海生命科学研究院细胞库;SPF 级BALB/C 雄性小鼠20 只,6~8 周龄,体重18~22 g,购自新疆医科大学动物实验中心,经新疆药物研究所动物伦理委员会批准(XJIMM-2019004-1),实验动物生产许可证号:SCXK(新)2018-0002,实验动物质量合格证号:65000700001086。
1.2 主要试剂与仪器
槲皮素(中国药品生物制品检定所,含量为99.1%,批号:100081-201610);LPS(Sigma,货号:L2880);伴刀豆球蛋白A(concanavalin A,Con A)(Solarbio,货号:C8110);2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)(Sigma,货号:D6883);酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒[Thermo Fisher,TNF-α 货号:88-7324;IL-6 货号:88-7064;γ 干扰素(interferon-γ,IFN-γ)货号:88-7314],MCP1(武汉华美,货号:CSB-E07430m);COX 抑制剂筛选试剂盒(Cayman Chemical Company,货号:700100);微孔板检测仪,美国美谷分子仪器(型号:SpectraMax M2)。……
