柳成东，肖明霞，李琦华，程志斌

（云南农业大学动物科学技术学院，云南昆明 650201）

我国农业农村部（第194 号公告）定于2020 年7月1 日起全面禁止促生长药物饲料添加剂的使用，包括饲用益生菌等诸多替抗类产品的筛选及应用成为重要研究方向[1]。凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）是分泌乳酸的芽孢杆菌属益生菌，近年来成为研究热点[2]。已有动物饲养试验显示，饲粮中添加单一凝结芽孢杆菌能通过抑制大肠杆菌、沙门氏菌等肠道主要有害菌，显著改善畜禽生长性能[3-5]；也有报道称，凝结芽孢杆菌与其他饲用益生菌组合的饲喂效果低于单一凝结芽孢杆菌[3,6]。由此可见，饲用益生菌等添加剂替抗的动物饲养试验易受试验动物、试验场地、试验条件等因素的影响，试验结果重复性不稳定[7-8]，且动物饲养试验的周期较长、费用高。因此，针对凝结芽孢杆菌等替抗产品性能的初步筛选，建立科学、高效的体外实验室评估方法，有助于提高动物饲养试验的研发效率和可重复性[7-8]。

牛津杯法已用于凝结芽孢杆菌的体外抑菌性能评估[9-15]，然而现有的报道存在2 个问题：其一，凝结芽孢杆菌抑菌作用的研究不系统。目前，凝结芽孢杆菌对肠道有害菌[12-15]及饲料源有害菌[9,12]抑制作用的研究较多，对多种商业饲用益生菌的抑制研究报道较少[9-10,12]，且对乳酸杆菌等肠道有益菌的抑制研究没有报道；其二，凝结芽孢杆菌的抑菌效果不明确。已报道的凝结芽孢杆菌牛津杯法抑菌试验均没有设计抗生素对照组，这不利于比较确定凝结芽孢杆菌的抑菌效果。……